B载体现货价格

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百奥莱博专业生产供应B载体现货价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：B载体现货价格
编号：BTN51104
英文名：Magic Vector B
产地：国产|进口
规格：2μg
本产品是专门用于高效快速克隆平末端DNA片段的专用载体,它是由Sma I酶切ClionG载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟ClionG载体一样，本产品带有自杀基因，Sma I位点位于该基因之中，只有当外源平末端DNA 插入片段插入Sma I位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以最后得到的转化子几乎都是含有平末端DNA 插入片段的重组子。

产品特点：
1. 即用性，可以直接用于连接反应，免去繁琐的酶切，电泳检测，纯化，去磷酸化，再纯化等步骤。
2. 具有Clion-G载体的所有优点，包括零背景,适用于所有E.Coli菌株,多拷贝的colEI型复制起始位点。
3.高效率，由于自杀基因的使用有效地减除了载体自身环化对平末端DNA 克隆的影响，自身环化得到的转化子在有选择液存在时只占总转化子的1%-5%。
4. 应用广泛，可用于克隆酶切产生的平末端DNA，Pfu酶扩增的PCR片段，cDNA片段，3´和5´RACE片段，Taq酶扩增的PCR片段(部分为平末端)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

自备试剂：
1.外源DNA片段。如果含又DNA片段的反应液中不含其他载体DNA(如酶切反应液，PCR反应液)，可以不需要凝胶回收,灭活酶后即可直接将反应液用于连接反应。PCR引物5´端一般为OH基团，最好在PCR后用T4 激酶磷酸化，否则连接效率极低。
2.感受态宿主菌。DH5α，DH10B或HB101等常用E.coli菌株。
3.连接反应试剂。请购买现成试剂盒。
4. 选择培养基。在倒LB 平板之前随产品赠送的选择液和Amp(如果附赠的选择液含Amp,则不必须额外加Amp)按比例加入到LB 之中,使选择液终浓度为1×，Amp 终浓度为50μg/mL(如果附赠的选择液含Amp,稀释到1X后Amp的终浓度即为50μg/mL),混匀后倒盘。

使用方法：

1.连接反应
a. 取新的经过灭菌处理的0.5mL Eppendorf 管,编号。
b. 将100 ng载体DNA转移到无菌离心管中，加两倍摩尔量的外源DNA片段，折合成重量(ng)=(外源DNA片段bp 数X 100 ng×2)/5330bp(载体DNA 长度)
c. 加蒸馏水至体积为8μl，于45℃保温5分钟，使重新退火的粘端解链。将混和物冷却至0℃。平末端DNA片段的克隆可以省去45℃保温5分钟这一步。
d. 加入10×T4 DNA ligase buffer 1μl，T4 DNA ligase 0.5μl，混匀后用微量离心机将液体全部甩到管底，于16℃保温1-24小时。
e. 同时做只有外源DNA片段没有质粒载体的组对照反应。没有必要做只有质粒载体而无外源DNA的对照组，因为自身环化的载体不能生长，能够生长的转化子基本上是两个载体分子相互连接形成的新载体。但在有两倍于外源DNA片段存在的情况下,两个载体分子连接的机率很小。
2. E.coli感受态细胞的转化
a. 各取每组连接反应液2μl按标准方法转化E. coli感受态细胞。
b. 每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上，37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。

MCS位点：


关于B载体现货价格的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
1-(2-吡*(代"啶")偶氮)-2-*酚 Pyronin Y 85-85-8
BTN100205 一站式DNA非变性PAGE电泳套装 One-Stop DNA Native PAGE Pack
D-对羟基*甘*酸 Complex amino acid 22818-40-2
铋试剂Ⅰ 3-Isocyanatopropyltrimethoxysilane 1072-71-5
9010-66-6 玉米蛋白 Zein
ARB13131 小鼠胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)酶联免疫定量检测 
BL0807 HRP标记羊抗人IgG抗体
线粒体蛋白提取试剂盒(2D电泳用)   50T|100T
Na-对甲*磺酰-L-精*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Carbonic anhydrase 1784-03-8
4-*联*(代"*") Thiabendazole 92-66-0
9014-01-1 蛋白酶(枯草杆菌) Proteinase(Bacillus subtilis)
PY01-033  糊精  AR|BR  500克  
对羟基*甲*(代"酸")正丁酯 TIBA 94-26-8
BL1189 无菌去离子水(For Cell Culture )
BL1418 "Western blotting(人IgG)
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·沉淀型TMB显色试剂盒
编号：BTN101106
英文名称：Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格：100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方，辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物，适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。即开即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

产品特点：
1．相对于DAB来说，灵敏度高。
2．色泽稳定，无须避光显色。
3．色带为蓝色，便于观察。
4．无毒环保，可以放心使用。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、免疫印迹染色
1．准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2-5分钟，直至深蓝色沉淀出现。
4．用镊子夹起固相膜，放入去离子水中清洗。
5．空气中晾干。
6．拍照记录。

二、免疫化学染色
1．准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．室温下，小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4．室温下孵育5-10分钟，或直至样本出现深蓝色。
5．小心移去切片上显色工作液。
6．室温下，小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7．小心移去切片上的PBS缓冲液。
8．放上盖玻片或封片。
9．(选择步骤)进行甲基绿复染。
10．立即在一般光学显微镜下观察：阳性呈现深蓝色。

注意事项：
1．加入1滴溶液A和1滴溶液B，可按比例增减
2．如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深
3．固相膜显色后数小时将会褪色，不能永久存在。
4．该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5．染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。

疑难解答：
Q：在ELISA底物反应过程中，为何有些孔呈蓝色，而另外的孔呈蓝绿色？
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象，不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的，建议降低二抗的浓度。
Q：ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀？
A：HRP浓度过高，建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q：如何降低背景读数？
A：建议降低一抗或二抗浓度，延长封闭时间。


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无*基酵母氮源[不含硫*(代"酸")胺] γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide
亮抑肽酶 2-Nitroso-1-naphthol 103476-89-7
C1601 驴血清(无菌过滤)
TBS-葡萄糖溶液   500ml
ARB13736 兔胸腺细胞球蛋白(ATG)elisa检测 
琼脂糖蛋白A VA
L-酪*酸二*盐 Norfloxacin 69847-45-6
次亚磷酸* PNPG 7789-79-9
DP405 TRNzol总RNA提取试剂
C0301 优级新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB13531 兔一氧化*(代"氮")(NO)Elisa定量检测 Rabbit nitric oxide,no ELISA KIT
ARB10595 人血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)ELISA代测服务 Human platelet-derived growth factor-bb,pdgf-bb ELISA KIT
SJ0673 TMB显色液A
乙二*(代"胺")四乙酸二*铜盐 Eosin Y free acid alcohol soluble 39208-15-6
植酸** DTAC 3615-82-5
ARB10221 人β乳糖蛋白抗体IgG 酶免分析 Human β anti-galactan proteins igG ELISA KIT
PY02-147  甘*酸培养基  250克  
SJ0731 小鼠外周血淋巴细胞分离液
维拉帕米盐*(代"酸")盐 Boc-D-glutamine 152-11-4
BTN120704 博莱霉素溶液 Bleomycin Solution

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