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- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
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36
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
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- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
细胞描述
人脐带单核细胞产品描述:单核细胞(monocyte)和淋巴细胞(lymphocyte)是外周血单个核细胞(Peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)重要的组成部分。单核细胞可以增强人脐带间充质干细胞的免疫抑制作用。公司提供的人脐带单核细胞均来自新鲜组织,用于培养人脐带单核细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人脐带单核细胞培养试剂盒(HumanUmbilicalCordPrimaCell:NormalUmbilicalMononuclearCellsCatNo.3-0421)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,人脐带单核细胞传12代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞传代:
人脐带单核细胞1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成“神经球”生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1. 人脐带单核细胞 取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm,5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x。
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硝酸异康唑质量规格:>99%,BRIsoconazole Nitrate
硝酸异康唑(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Isoconazole Nitrate
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异维A酸(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Isotretinoin
人脐带单核细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 到 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
白细胞之一,胞体较大,直径约为15-30酶μm,胞质内没有颗粒,它们约占血液中白细胞数的4%-8%。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞,并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血流时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较,单核细胞内含有更多的非特异性脂酶,并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中,细胞体积继续增大,直径可达50-80μm,细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多,成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞,它们经常大量存在于淋巴结、肺泡
亦称单球、单核白细胞、大淋巴细胞。约占人流动血液白细胞的4— 8%,与淋巴细胞和粒细胞是完全不同的一个独立的白细胞系统。直径为 13— 21微米(平均 16.7微米),在血细胞中最大,核的染色性很弱,也有没有颗粒,但多数在细胞的中心部分含有天青颗粒。氧化酶反应为弱阳性,游走能力虽然较弱,但吞噬作用却非常强。炎症组织内的巨噬细胞主要是这种细胞,单核细胞与以往所认识的不同,现已确定它不能过渡成为嗜中性白细胞。它与移动型大单核细胞合称为单核细胞。关于其起源问题,很早就有过争议,但现在均认为
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