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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
56
- 英文名:
Human Umbilical Cord : Normal Umbilical Mononuclear Cells
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 是否是肿瘤细胞:
否
人脐带单核细胞简介:
单核细胞(monocyte)和淋巴细胞(lymphocyte) 是外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)重要的组成部分。单核细胞可以增强人脐带间充质干细胞的免疫抑制作用。烜雅生物科技提供的人脐带单核细胞均来自新鲜组织,用于培养人脐带单核细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人脐带单核细胞培养试剂盒(Human Umbilical Cord PrimaCell™: Normal Umbilical Mononuclear Cells Cat No. 3-0421)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下,人脐带单核细胞传12代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人脐带单核细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
单核细胞(monocyte)和淋巴细胞(lymphocyte) 是外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)重要的组成部分。单核细胞可以增强人脐带间充质干细胞的免疫抑制作用。烜雅生物科技提供的人脐带单核细胞均来自新鲜组织,用于培养人脐带单核细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人脐带单核细胞培养试剂盒(Human Umbilical Cord PrimaCell™: Normal Umbilical Mononuclear Cells Cat No. 3-0421)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下,人脐带单核细胞传12代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人脐带单核细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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