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- 百奥莱博
- HR8116-CDN
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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193
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长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
冷藏
- 规格：
500ml
特别提示：包括Western转移缓冲液(5×),尼龙膜在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Western转移缓冲液(5×),尼龙膜
产品货号：HR8116
产品规格：500ml
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文献和实验以毛细管转移进行Northern Blotting转印实验方法与步骤
，静置5 min。 3) 根据图所示，依序在塑料盒上堆栈玻璃板、滤纸 (作为盐桥)、电泳胶、尼龙膜、三层滤纸、与吸水纸，以便以毛细管转移方式将RNA 转印于尼龙膜上;塑料盒内装入适量20×SSC，以便作为转移缓冲液。 以毛细管转移法进行核酸转印 注意： a. 滤纸与尼龙膜应先以20×SSC 润湿，再用于堆栈。 b. 在滤纸、尼龙膜、与电泳胶夹层间可能会有气泡存在，因此在放好电泳胶、尼龙膜或滤纸后，应立即检视，并以食指轻轻平移
，即可固定DNA 。 3. 转移缓冲液( transfer buffer )的选择： 带正电荷的尼龙膜：可用高盐离子强度( SSC )，但不能充分发挥膜潜能; 0.4N NaOH ，共价结合DNA 是最大优点。 硝酸纤维膜：高盐离子强度促进DNA 与膜结合( 20 × SSC )，低盐离子强度导致小片段DNA 在转移过程中丢失， pH>9 ，DNA 不能与膜结合。 4. 转膜时间( duration of transfer )约 12 hrs
免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射，生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
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