胰蛋白酶溶液（胰蛋白酶0.25%，EDTA0.02%）

EDTA-胰蛋白酶的配制

问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没

正常人包皮成纤维细胞的培养

实验材料： 1. 细胞来源：新生儿包皮； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液：两者比例为1：1，用D-Hanks液配制； 4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂：用DMEM培养液配制； 5. 生长基质：人纤维连接蛋白，按10μg/cm2 包被培养皿； 6. DMEM培养液：DMEM培养基，加10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

，Rb，TopoismeraseⅡ 等。 2、酶消化方法 常用 0.1% 胰蛋白酶和 0.4% 胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至 37℃，切片也预热至 37℃，消化时间约为 5~30 分钟（胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从 0.05% 至 0.25% ）； 胃蛋白酶消化37℃ 时间为 30 分钟。皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin 溶液，消化时间为室温孵育 30 分钟。 适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen