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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
41
- 英文名：
50μL
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50μL
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
Lyso-Tracker Red( 溶酶体红色荧光探针 )50μL保存详细介绍：
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Lyso-Tracker Red( 溶酶体红色荧光探针 )50μL保存操作流程：
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
Lyso-Tracker Red( 溶酶体红色荧光探针 )50μL保存注意事项：
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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文献和实验Recombineering/Lambda red-mediated gene replacement
in 2 mL LB + 50 μg/mL Amp add 50 μL 10 mg/mL Ampicillin stock Include enough samples for two conditions: +/- L-arabinose induction When OD600 of cells(+pKD46) reaches 0.1, add L-arabinose to concentration
A[hygro] was co-transformed with the pSC101BADγβαA[hygro] vector into HS996 electrocompetent E. coli cells harbouring the pSC101BADγβαA[tet] vector and recombination was achieved using standard Red/ET protocols (8) and selection with Ap 50 μg/ml
。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清。 5．细胞悬液中加入500 μL JC-1染色工作液重悬细胞。37°C，5%CO2培养箱中孵育15-20 min。 注：培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C，其他种属根据细胞培养条件选择合适的温度。 6．300 g离心5 min，弃上清，加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer洗涤2次。 7．加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer重悬细胞。 8．样本置于冰上保存，30 min内用流式细胞仪检测。 三
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