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预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次

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      10 次

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    • 供应商

      上海抚生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      10 次

    预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次费用操作流程:
    1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
    2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
    3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
    4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
    预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次费用注意事项:
    1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
    2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
    3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
    预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次费用实验要点:
    1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
    预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次费用详细介绍:
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    • 14kd 蛋白wb的有关问题

      liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。

    • 常用蛋白质分子量标准参照物

      (1)高分子量标准参照 (2)中分子量标准参照 (3)低分子量标准参照 肌球蛋白 212,000 磷酸化酶B 97,400 碳酸酐酶 31,00 β-半乳糖甘酶B 116,000 牛血清白蛋白 66,200 大豆�蛋白酶 21,500 磷酸化酶B 97,400 谷氨酶脱氢酶 55,000 抑制剂 牛血清白蛋白 66,200 卵白蛋白 42,700 马心肌球蛋白 16,900 过氧化氢酶` 57,000 醛缩酶     40,000 溶菌酶   14,400 醛缩

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