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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
100mL
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100mL
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL说明书注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL说明书实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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溴肽林(标准品) 质量规格:>99%,BR Barnidipine HCl
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溴百里酚蓝钠盐 质量规格:效价测定 Cefepime Hydrochloride
溴-6-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR) 质量规格:≥98.5%(按照干品计算) Loxoprofen sodium
溴-6-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR) 质量规格:含量测定 Loxoprofen sodium
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熊去氧胆酸(UDCA) 质量规格:HPLC>98%,标准品 Paeonol
熊果酸;乌苏酸(标准品) 质量规格:≥97%,BR Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine
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文献和实验过的水配制,那么在药品称量、调pH值等过程中tris缓冲液会造到RNase的再次污染,所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是RNase并不顽固,高压灭菌可以去除其大量活性。 下面的实验照片(照片来自ambion)很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单,将不同含量的RNase用高压灭菌处理,然后与未高压灭菌处理的RNase一起来降解RNA(37度1小时),结果表明,当RNase的污染量小于100ng/ml时,高压灭菌可以去除其活性。这张照片还说明了一个问题,当你的RNA溶液中含有
溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。 10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套) 5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml
。所有的操作可以在一小时内完成。Trizol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A) 选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。 实验试剂 Trizol 溶液 氯仿 异丙醇 75%乙醇 DEPC 实验设备 超净工作台 1.5 mL离心管 移液枪 紫外分光光度计
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









