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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
避光-20℃,保存一年
- 克隆性:
详询
- 标记物:
详询(烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体)
- 适应物种:
h,m,r
- 保质期:
一年
- 抗原来源:
Polypeptide
- 目录编号:
XY-KT-3419
- 级别:
生产厂家
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 宿主:
Rabbit,mouse
- 应用范围:
ih,wb
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
详见说明书
- 抗体英文名:
Collagen Ⅳ
- 抗体名:
Collagen Ⅳ
- 规格:
100-200ul
[产品简介]
下面是我公司为研究者们总结出的Collagen Ⅳ抗体实验遇到的常见问题
FISH常见问题
消化不足
表现:细胞成块,没有清楚的边界;信号弱,可见细胞间连接物。解决:检查酶溶液的温度并增加消化时间;检查预处理液的温度并增加预处理的时间。
过消化

表现:没有清楚的细胞边界,细胞形态被破坏;可能有弱的或缺失的信号;荧光背景高。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
过预处理
表现:没有清楚的细胞边界,具不规则的细胞形态;可能有弱的或缺失的信号。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
杂交时间不当
表现:形态正常、信号弱;解决:增加杂交时间;检查探针量;检查杂交后洗脱条件。
背景高
原因:杂交后洗脱不充分。解决:检查洗脱液的温度。
信号强度变化
原因:由于气泡造成的探针不均匀分布。解决:重复实验并确认杂交期间盖玻片下无气泡;在探针混合物的第一接触面加盖盖玻片。组织掉片或组织形态分解
原因:组织固定不足;使用不恰当的玻片;不正确的烤片;移除盖玻片时组织被撕掉;过消化;过预处理。解决:校验固定条件;使用正确的玻片;校验烤片条件;泡更长的时间使盖玻片脱落。
过变性
表现:线状信号。解决:检查变性的时间和温度。无/弱信号
| 可能的原因 | 推荐的解决方案 |
| 未添加探针(别笑,特别是探针和杂交缓冲液分开的非预混情况) | 探针充分解冻,确保移液器吸取到探针试剂。 |
| 探针、杂交缓冲液使用前没有充分混匀(非预混探针) | 吹打探针混合液,使探针充分混匀,短暂离心。 |
| 探针添加数量不足 | 确保移液器吸取准确,探针加入量足量,请不要稀释探针(包括预混和非预混)。 使用前确保探针解冻充分并达到室温。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 杂交条件不合适 | 确保遵守杂交所规定的时间和温度。 橡皮胶封片时勿留缝隙。 根据情况,调整杂交时间(跨度一般较大)和湿度。 |
| 杂交时盖玻片下有气泡形成 | 放盖玻片时要覆盖探针表面,轻轻挤压以便挤出气泡。 |
| 玻片干燥不充分 | 探针滴加至玻片前,确保玻片上的乙醇溶液已经完全挥发。 |
| 探针干燥太快 | 探针滴加后应立即将盖玻片覆盖目标区域。 进行洗脱时,一次只能移除一张玻片上的盖玻片,并且在移除下一张之前立即将玻片浸入洗脱液中。 |
| 洗脱液或洗脱条件不正确 | 确保按照产品说明书要求配制洗脱液(生产商提供洗脱液的除外)。 确保洗脱液的温度达到洗脱步骤所规定温度。 玻片浸入洗脱液前移去盖玻片。 |
| 探针或标本玻片储存不正确 | 确保探针-20℃避光保存。 将未杂交玻片干燥后置于-20℃长期保存或者室温短期保存(一般不超过两星期)。 将杂交后玻片置于-20℃避光保存。 |
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文献和实验Ⅳ型超敏反应机制 经典的迟发型超敏反应可由结核杆菌皮内注射而诱发。如果宿主曾经接触过结核杆菌,就会在24-72h后出现一个由T细胞介导的局部炎症反应。抗原接种大约4h之后,中性粒细胞在注射部位开始迅速聚集,血管内皮细胞也显示出一系列的形态和功能变化,包括生物合成的增加,细胞器合成的加速,并且发生血浆大分子的渗漏。血纤蛋白原(hbrin。gen)从血液渗透进入周围组织。纤维沉积和部分T细胞及单核细胞聚集,使注射部位的血管外组织形成肿胀和硬结。作为DTH的一个
复合物Ⅳ又称细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase)。总相对分子质量为200kDa。复合物Ⅳ是以二聚体的形式存在,它的亚基Ⅰ和Ⅱ都含有4个氧化还原中心(redox-active centers)和两个a型细胞色素(含有1个a、1个a3)和两个Cu。主要功能是将电子从细胞色素c传递给O2 分子, 生成H2O∶4cyt c2 O2 4H → 4cyt c3 2H2O。每传递一对电子,要从线粒体基质中摄取4个质子,其中两个质子用于水的形成,另两个质子被跨膜转运到膜间隙
靶细胞时,还会释放出各种淋巴因子,引起单核细胞浸润为主的炎症变化,甚至坏死。主要病变是以单核细胞为主、由溶菌酶类引起的组织坏死。除接触性皮炎和某些自身免疫性疾病外,其他Ⅳ型变态反应都无个体差异。Ⅳ型变态反应的发病机理与细胞免疫反应基本相同,两者同时并存。由此可见,当致敏T细胞与相应抗原结合、发生反应后,对机体有有利的一面(细胞免疫的免疫防护作用),也有有害的一面(Ⅳ型变态反应)。一般来讲,正常的细胞免疫反应既能局限和排除病原微生物,又不致造成组织的严重损伤。若反应过于强烈,超过正常,则会造成
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