Stbl2化学感受态细胞

特别提示：包括Stbl2化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Stbl2化学感受态细胞
英文名称：Stbl2 Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0011
产品规格：10×100μl/50×100μl

Stbl2菌株来源于JM109 E.coli strain，适合克隆不稳定插入片段(正向重复序列，逆转录病毒序列等)；mcr A突变和mcr BC-hsdRMS-mrr deletion使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。
recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。不存在lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。
Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19检测转化效率可达109 cfu/μgDNA。
保存条件：-80℃
基因型：
F-mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB)
操作说明：
1.Stbl2感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.培养基，使用其他培养基会降低转化效率。
4.30℃，225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟。)
5.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃培养过夜)
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

除了Stbl2化学感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：



名称：裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
货号：BTN100103B
规格：20次
本裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备裂殖酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备裂殖酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ，其他多种实验用酵母菌株zuì好选用酵母化学感受态细胞制备试剂(BTN81109)。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母(如双杂交体系中的酵母)。
5. zuì高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变、基因破坏、等位突变基因修复等实验。
8. 本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100mL裂殖酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带高效转化液。

试剂盒组成：

组分	BTN100103A	BTN100103B
溶液A	1ml	1ml
高效裂殖酵母转化液	-	一套(20次)
使用说明书	1份	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用效果：
将一个酵母菌落接种到SLD培养基中，30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0，冰浴15分钟后离心弃上清，用自备无菌水洗涤三次，然后用相当于菌液zuì初体积百分之一的溶液A重悬，按每管50μl分装，放-80℃保存。