- ￥1000 - 2000
- 上海烜雅
- 国产/进口
- XY-KT-2955
- 2026年02月03日
- ih，wb
- Rabbit，mouse
- h，R，m，r
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
详见说明书
- 亚型：
IgG
- 形态：
Lyophilized or Liquid
- 保存条件：
避光-20℃，保存一年
- 克隆性：
详询
- 标记物：
详询（烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体）
- 适应物种：
h，R，m，r
- 保质期：
一年
- 抗原来源：
Polypeptide
- 目录编号：
XY-KT-2955
- 级别：
生产厂家
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 宿主：
Rabbit，mouse
- 应用范围：
ih，wb
- 浓度：
1mg/ml
- 靶点：
详见说明书
- 抗体英文名：
PKC gamma
- 抗体名：
PKC gamma
- 规格：
100-200ul
适应物种：h，R，m，r
级别：生产厂家
纯度：＞95%
浓度：1mg/ml
分子量：详见说明书
形态：Lyophilized or Liquid
克隆类型：Polyclonal
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免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的 分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科 的重要研究手段。作为初次使用本公司的抗体从事免疫组化的客户可能遇到许多问题，大体 归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他 一些小问题。现在就以上几点分别说明。
非特异性着色
非特异性着色就是在理论着色区域外的着色，这种着色与背景是有区别性的。
主要原因：
- 标本原因，肝肾内源性生物素含量高，与 SABC 结合导致非特异性着色，皮肤肺组织胶 原含量高，由于胶原带负电荷，易吸附试剂导致非特异性着色。
- 切片干涸导致的边缘效应。
- 抗体浓度过高。
- 组织在处理中存在出血区域坏死区。
- 洗涤不充分。
- 显色剂氧化，显色时间长。
- 一抗应做浓度梯度，选择阳性强，背景好，信躁比高的浓度，作为抗体实验浓度；二抗浓 度和时间一般不变。
- 稳定实验条件，严格按操作说明进行。
- 在实验中应保持切片始终处于水平状态避免抗体流失，避免切片干涸。
- 在实验中应将试剂覆盖面积大于切片面积。
- 洗涤要充分，在背景十分深时，可用 37℃预温的 PBS 浸泡
- 防止显色剂的氧化，尤其是配制显色剂使用的容器，最好是灭菌过的；显色时间应在显微 镜下严格控制。
着色部位不对
情况一：本是胞浆抗原有着色，但实验结果显示在胞核有着色。
原因及解决办法：
- 修复时间过长，修复条件十分严苛，这时应降低反应强度，减少修复时间。
- 组织在二中静置时间过长，这时应更换标本。
- 抗体中含有抗核蛋白抗体，这种情况已不多见。
- )标本原因，标本处理不慎会导致总在同一个地方出现着色。
原因及解决办法：
- 核抗原不易暴露，需用热修复或延长修复时间来充分暴露。
- 蛋白质是在胞浆翻译的，再转运至其他部位，所以出现浆着色也属正常。
情况三:本是胞膜抗原但显示结果却是在胞浆和胞膜都有着色。
原因：蛋白质是在胞浆翻译的，再转运至其他部位，处于转运过程中的膜蛋白有可能显示在胞浆。
假阳性
如不加一抗也有阳性信号
主要原因：
二抗引起的交叉，球蛋白是一个超家族，哺乳动物种属来缘近的容易发生交叉反应。如：羊 抗兔抗体可与兔标本中球蛋白反应，二抗羊抗小鼠也可与大鼠，小鼠中的球蛋白起反应，尤 其在修复的情况下。
无阳性
主要原因：
1.抗原稳定性问题，由于许多蛋白质半衰期短易被破坏，如 P53 半衰期只有 30 秒而 PCNA 等抗原稳定。
2.标本制作过程中烤片时间过高时间过长，标本制作不规范。
3.实验中漏加试剂，实验操作不规范。
解决方法：
- 在标本固定中应该严格操作，做到及时固定。
- 在浸蜡时温度不要太高，时间不要过长。一般 2 小时×2 次。烤片温度一般在 60℃左右 30 分钟。
- 实验中要严格按照实验步骤操作。在所做指标既有单抗又有多抗时，要将一抗和二抗严格 对应。
原因及解决方法：
- 一抗浓度过低，解决方法：提高一抗浓度
- 孵育时间过短，解决方法：按说明书严格操作
- 抗体流失，解决方法：补加抗体
- 显色时间过短，解决方法：在显微镜下控制反应时间
- 抗原修复方法不当，抗原修复有许多种方法，如：修复、消化，不消不修，寻找适合的方 法是解决阳性弱的有效方法之一
其他问题及注意事项
- 在实验中尤其在修复后切片容易脱片，切片脱片的原因是什么？
- DAB 中 A 液无颜色或颜色很深是否影响实验结果？
- 冬天气温低洗涤不充分，可能出现背景高， 应对方法用 37℃欲温 PBS 洗涤
- 抗体是否能做兔标本 答：以说明书为准，一般能做人、大鼠、小鼠也可能做兔，这是由于种属亲缘关系决定的
烜雅生物PKC gamma抗体热销产品：
| XY-KT-5200 | ER- Alpha/FITC | 荧光素标记雌激素受体α抗体IgG |
| XY-KT-5201 | ER-alpha/FITC | 荧光素标记雌激素受体抗体IgG |
| XY-KT-5202 | ER- Alpha/FITC | 荧光素标记雌激素受体α抗体IgG |
| XY-KT-5203 | ER- Alpha(phospho-S167)/FITC | 荧光素标记抗人磷酸化雌激素受体α抗体IgG |
| XY-KT-5204 | ER- Alpha/ Beta /FITC | 荧光素标记雌激素受体α/β抗体IgG |
| XY-KT-5205 | NR1D1/REV-ERB alpha/FITC | 荧光素标记细胞核受体Rev-Erbα抗体IgG |
| XY-KT-5206 | Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59)/FITC | 荧光素标记磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体IgG |
| XY-KT-5207 | ER- Beta/FITC | 荧光素标记雌激素受体β抗体IgG |
| XY-KT-5208 | ER- Beta/FITC | 荧光素标记雌激素受体β 抗体IgG |
| XY-KT-5209 | Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化雌激素受体α抗体IgG |
| XY-KT-5210 | Phospho-Estrogen Receptor α (Ser104/106) /FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化雌激素受体α抗体IgG |
| XY-KT-5211 | ESA/FITC | 荧光素标记ESA抗体IgG(标记抗体) |
| XY-KT-5212 | E-Selectin/FITC | 荧光素标记E选择素抗体IgG |
| XY-KT-5213 | ET-1/FITC | 荧光素标记内皮素-1抗体IgG |
| XY-KT-5214 | ET-1/FITC | 荧光素标记内皮素-1抗体IgG |
| XY-KT-5215 | ET-1/FITC | 荧光素标记内皮素-1抗体IgG |
| XY-KT-5216 | ET-1/HRP | 辣根过氧化物酶标记内皮素-1单克隆抗体IgG |
| XY-KT-5217 | ET-1/Biotin | 生物素标记内皮素-1单克隆抗体IgG |
| XY-KT-5218 | ETFB/FITC | 荧光素标记电子转移黄素蛋白β肽抗体IgG |
| XY-KT-5219 | ETK/BMX/FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体IgG |
| XY-KT-5220 | Phospho-ETK (Tyr40) /FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体IgG |
| XY-KT-5221 | E Tag/FITC | 荧光素标记抗E Tag抗体IgG |
| XY-KT-5222 | ets1/E26 /FITC | 荧光素标记Ets转录因子家族ets1抗体IgG |
| XY-KT-5223 | Eukaryotic aspartyl protease/FITC | 荧光素标记天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体IgG |
| XY-KT-5224 | EV71/FITC | 荧光素标记肠道病毒71型/手足口病病毒抗体IgG |
| XY-KT-5225 | EV71(CT)/FITC | 荧光素标记肠道病毒71型/手足口病病毒抗体(C端)IgG |
| XY-KT-5226 | EXPB-2/FITC | 荧光素标记植物延展素-βIgG |
| XY-KT-5227 | Ezrin/FITC | 荧光素标记埃兹蛋白抗体IgG |
| XY-KT-5228 | Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化埃兹蛋白抗体IgG |
| XY-KT-5229 | Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC | 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化埃兹蛋白抗体IgG |
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文献和实验trick 现在大部分的文章做到PKC的活化都是通过western检测磷酸化，这个我也做过，但是不太明显，所以想从pkc转位这个角度做它的活化研究。。 但是看了一些文献和综述，conventional pkc和novel pkc这样检测他们的活化都是没有问题的，但是有的综述上说atypical pkc的活化是不发生转位的，因为它相对与前2者缺乏一个佛波酯激活域，但是我也看到一些文献做atypical pkc的活化也是通过做他的转位的，就很困
licanming 请问有无人用过assaydesigns公司的PKC Kinase Activity Assay Kit（cat NO:EKS-420A）?可否说一下应用的经验？注意事项等？还有，该试剂盒的说明书有几处地方不是很懂，请大家帮忙看一下： 1、To avoid cross contamination, change disposable pipette tips between the addition of each standard
三七家园 呵呵，希望大侠们，大牛们，前辈们不吝赐教。。。。:P licanming 可以讲具体一点吗？ 三七家园 谢谢楼上的关心，我现在要检测pkc三个亚基δ,ε,ζ在用0.2uM的PMA（pkc的激动剂）后如何被激活？（是被磷酸化呢？还是蛋白量表达增加？或者别的什么？）怎样检测这种激活？（如果是前两个，我想用western blot因为我现在只会这个技术） ffyy
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