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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
275
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
35KU|3500KU
特别提示:包括T4 DNA连接酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T4 DNA连接酶
英文名称:T4 DNA Ligase
产品货号:MT0054
产品规格: 35KU|3500KU
T4 DNA 连接酶可催化相邻DNA 链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶,不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也可以催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。可应用于在粘性末端或平末端连接双链DNA分子,也可应用于修补双链DNA、RNA或DNA RNA杂交体上的缺口。
产品组成:
| 组分 | 35KU | 3500KU |
| T4 DNA Ligase(350 U/μl) | 100μl | 1ml×10 |
| 10×Ligation Buffer | 250μl | 20ml |
储存条件:20℃可保存1年,-80℃可保存3年,避免反复冻融。
活性定义:在20μl连接反应体系、0.12μM(300μg/ml)的5’-末端浓度条件下,16℃反应30分钟,能使50%HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个活性单位。
除了T4 DNA连接酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:T3 RNA聚合酶
货号:BTN120309
规格:1000U
本酶是噬菌体T3 DNA编码的酶,对T3启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5′→3′的RNA聚合酶活性,以含有T3启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
产品用途:
1.为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2.制作 RNA 剪接反应的前体。
3.以帽类似物为引物,制作Capped mRNA。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| T3 RNA聚合酶 | 50μL(20U/μL) |
| 5×转录缓冲液 | 0.25mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。
名称:AvaII限制性内切酶
货号:SV0073
规格:10KU|10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm 和哺乳动物 CpG甲基化敏感。
名称:BsrI限制性内切酶
货号:SV0233
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 10%
特性
省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1,65℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml
37℃ 时活性
20%。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
名称:NotI限制性内切酶
货号:SV0552
规格:2500U|2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
彻底消化超螺旋质粒需要的 Notl 酶量为消化线性 DNA的 5 倍。
名称:PacI限制性内切酶
货号:SV0577
规格:1250U|250U|125U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
名称:RsaI限制性内切酶
货号:SV0639
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:T3 DNA 连接酶
货号:SV1030
规格:750KU|100KU
特性:
连接粘性末端或平末端
高盐耐受力
dsDNA 切刻修复
概述:
T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶,可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍,因此,当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时,就多了一个选择。
来源:
重组 E. coli 质粒,含有 T3 DNA 连接酶编码基因。
反应条件:
1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl,1 mM ATP,10 mM MgCl2,1 mM DTT,7.5% PEG 6000(pH 7.6 @ 25℃)],25℃ 温育。
质保声明:
T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测,以确保zuì高的纯度和反应效率。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位是指在 20 μl 总反应体系中,1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下,25℃ 温育 1 分钟,能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。
浓度:
3,000,000 units/ml。
注意事项:
ATP 是必需的辅因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时,可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液,但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验,建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。
65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG,该酶不能加热失活,否则会抑制后续转化实验。
名称:糖原合成酶激酶 3(GSK-3)
货号:SV1572
规格:50KU|10KU
概述:
可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用,蛋*磷酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长,确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的氨基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法,这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。
由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构,这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构,因此把问题简单化了(见综述 1),没有考虑到二级及三级结构,也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素,此外,在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响,因此,使用这些序列时应该慎重。
另一方面,这些共有序列已经被证实是识别的关键序列,简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽,除了能预测磷酸化位点以外,往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
下表列出了 我公司提供的蛋白激酶特异性序列,磷酸基接受位点用红色标出,可以进行功能替换的氨基酸用斜杠(/)标出,对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。
某些蛋白激酶在它们的识别序列中包括磷酸氨基酸残基,被称为“hierarchical”白激酶(见综述 3),如:CKI 和 GSK-3。它们通常需要另一个激酶预先在它们自己的磷酸化位点附近磷酸化,S(P)表示这种预先存在的丝氨酸残基。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
相关专题 重组DNA技术工具酶 连接酶旧称“合成酶”。DNA连接 酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。 DNA连接 酶
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