蛋白示踪上样缓冲液(还原，5×)

特别提示：包括蛋白示踪上样缓冲液(还原，5×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：蛋白示踪上样缓冲液(还原，5×)
英文名称：The protein sample buffer
产品货号：SNM451
产品规格：5ml



除了蛋白示踪上样缓冲液(还原，5×),，我公司还供应以下相关产品：



名称：考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)
货号：YT056
规格：1盒
本品采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲*，但含有刺激性气味的乙酸。

试剂盒组分：
考马斯亮蓝染色液————————100ml
考马斯亮蓝染色脱色液——————500ml

储存条件：室温，有效期一年。

名称：蛋白电泳预制胶(15%，10孔/15孔)
货号：SNM456
规格：10块/盒

名称：蛋白电泳预制胶(12%，10孔/15孔)
货号：SNM457
规格：10块/盒

名称：8-16%预制胶(205-14 kDa分离范围;15个样/胶)
货号：KFS090
规格：一盒(10个)

名称：端粒酶活性荧光实时定量PCR法检测试剂盒(人)
货号：KFS307
规格：50T

名称：4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8
货号：SY0354
规格：250ml
Tris也称Tris base或2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol。 分子式为C4H11NO3，分子量为121.14。

4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液中含有1.5M Tris base，0.4% SDS，用 HCl调节pH至8.8，25℃。用于SDS-PAGE下层分离胶的配制。配制时无需再加10%SDS。

本品为4倍浓缩液，使用时稀释成1×工作液即可。

储存条件：4℃。

名称：DAB法显色试剂盒(山羊IgG)
货号：QN1160
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗山羊IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐酸调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。