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- 2025年12月15日
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- 文献和实验
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- 规格：
10支-5ml
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文献和实验一、实验试剂 采用T7 Tag Affinity Purification Kit T7 Tag抗体琼脂。B/W缓冲液：4.29 mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl， 0.137 mM NaCl，1%吐温-20，pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1 M柠檬酸，pH2.2 中和缓冲液：2 M Tris，pH10.4。 PEG 20 000。 二、实验步骤 1. 100 ml 含重组表达质粒的菌体诱导后，离心5 000 g×5 min，弃上清
， 0.137mM NaCl，1%吐温-20，pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸，pH2.2. 中和缓冲液：2M Tris，pH10.4。 PEG 20000。 实验步骤 1.100ml 含重组 表达质粒的菌体诱导后，离心5000g×5min，弃上清，收获菌体，用10ml预冷的B/W缓冲液重悬。 2. 重悬液于冰上超声处理，直至样品不再粘稠，4℃离心 14000g×30min，取上清液，0.45μm膜抽滤后作为样品液。 3. 将结合T7&bull
7·Tag抗体琼脂。2. B/W缓冲液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl，3. 0.137mM NaCl，1%吐温-20，pH7.3。4. 洗脱缓冲液： 0.1M柠檬酸，pH2.2。5. 中和缓冲液：2M Tris,pH10.4.6. PEG 20000.（二）操作步骤1.100ml 含重组表达质粒的菌体诱导后，离心5000g×5min，弃上清，收获菌体，用10ml预冷的B/W缓冲液重悬。2. 重悬液于冰上超声处理，直至样品不再粘稠，4℃离心
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