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- 百奥莱博
- SV0809-UBR
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- 2025年07月14日
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119
- 英文名：
Nb.BbvCI切刻内切酶
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
5KU|1KU
特别提示：包括Nb.BbvCI切刻内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Nb.BbvCI切刻内切酶
英文名称：Nb.BbvCI切刻内切酶
产品货号：SV0809
产品规格：5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
除了Nb.BbvCI切刻内切酶,，我公司还供应以下相关产品：
名称：DNase I(不含RNase)
货号：WE0213
规格：1000U
DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5"-磷酸基团和3"-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。
产品组成：
| 组份 | 1000U |
| DNaseⅠ(RNase Free),1 U/μl | 1ml |
| Reaction Buffer(with MgCl2),10× | 1ml |
| 200 mM EDTA | 1ml |
实验前准备及重要注意事项：
1、因为DNase I 经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验，所以在酶制备过程中zuì大限度的避免了RNase污染，可以安全地用于RNA的提取，但由于该酶中不含RNase 抑制剂，提醒使用时注意防止外源RNase的污染。
2、DNase I受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
3、每处理1μg RNA，DNase I用量不要超过1U。
使用说明：
1、以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配置10μl反应体系，如下表：
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| RNA | Xμl | 1μg |
| Reation Buffer(with MgCl2)，10× | 1μl | 1× |
| DNaseⅠ(RNase Free) | 1μl | 1 U |
| RNase Free Water | Yμl | 补足至10μl |
2、37℃孵育30分钟。
3、加入1μl 200 mM EDTA，65℃孵育10分钟，使DNase Ⅰ失活，终止反应。
4、处理后的RNA可用于RT-PCR。
储存条件：室温(15～30℃)
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文献和实验I（10）、Xmn I（2）。 酶识别特异性的改变受酶本身的性质及可能引起星号活性的反应条件影响。常见的引起酶识别改变的条件有：单碱基替换、识别序列外侧碱基缩短以及单链切刻（10）。Polisky等（4）对EcoR I的早期研究表明，在低盐浓度、高pH值条件下，EcoR I可能切割N/AATTN序列；最近，Gardner等（11）的研究表明，只要识别中心的四碱基序列（AATT）不出现A/T替换，EcoR I可以切割其它任何单碱基替代序列。 大多数星号活性是可以控制的，做酶切
用的，到了美帝反倒一次没用过，这边比较流行直接用PCR产物切，就是回收完了直接切上，回收后然后连接，这又回到了最开始设计，要加保护碱基。这个策略好处就是免除了T载体这步，直接插入目的载体，存在的问题就是处于盲做状态，还要加保护碱基。 3. 酶切 我的原则一向是：尽量避免PCR，能酶切的多酶切，实在没办法才去PCR。 这里强烈推荐NEB的内切酶，还记得在有一次用别家的酶切过夜，结果质粒都被切碎了（当然当时质粒浓度也不高），而用NEB的酶，切个七十二小时仍旧一切OK，尤其现在NEB还推出了HF
避免PCR，能酶切的多酶切，实在没办法才去PCR。 这里强烈推荐NEB的内切酶，还记得在有一次用别家的酶切过夜，结果质粒都被切碎了(当然当时质粒浓度也不高)，而用NEB的酶，切个七十二小时仍旧一切OK，尤其现在NEB还推出了HF的内切酶，没有星活性而且统一都用Buffer4，很好用，在国内我都用TAKARA的酶，基本上还可以。注意要读说明书，选用什么buffer，多少度，用不用加BSA，这些都要仔细读。 酶切的起始量，PCR产物没甚么可说的，全都切上，如果是从质粒上切片
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