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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
Nb.BsrDI
- 保质期:
2年
- 供应商:
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件:
﹣20℃
- 规格:
2000U
产品介绍
5'...G C A A T G N N...3'
3'...C G T T A C↑N N ...5'
Nb.BsrDI 是一种切刻内切酶,可识别GCAATGNN序列,仅切割 dsDNA 底物的一条链;在 dsDNA 底物上产生切口,而不切开dsDNA。
使用通用缓冲液1× LSfast™ Buffer 于65℃下切割效率最佳。
本品在37℃进行酶切反应时,有 50% 的活性。
产品组成
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组分 |
规格 |
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Nb.BsrDI (10 U/μl) |
200 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
2×1 ml |
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文献和实验I(10)、Xmn I(2)。 酶识别特异性的改变受酶本身的性质及可能引起星号活性的反应条件影响。常见的引起酶识别改变的条件有:单碱基替换、识别序列外侧碱基缩短以及单链切刻(10)。Polisky等(4)对EcoR I的早期研究表明,在低盐浓度、高pH值条件下,EcoR I可能切割N/AATTN序列;最近,Gardner等(11)的研究表明,只要识别中心的四碱基序列(AATT)不出现A/T替换,EcoR I可以切割其它任何单碱基替代序列。 大多数星号活性是可以控制的,做酶切
用的,到了美帝反倒一次没用过,这边比较流行直接用PCR产物切,就是回收完了直接切上,回收后然后连接,这又回到了最开始设计,要加保护碱基。这个策略好处就是免除了T载体这步,直接插入目的载体,存在的问题就是处于盲做状态,还要加保护碱基。 3. 酶切 我的原则一向是:尽量避免PCR,能酶切的多酶切,实在没办法才去PCR。 这里强烈推荐NEB的内切酶,还记得在有一次用别家的酶切过夜,结果质粒都被切碎了(当然当时质粒浓度也不高),而用NEB的酶,切个七十二小时仍旧一切OK,尤其现在NEB还推出了HF
避免PCR,能酶切的多酶切,实在没办法才去PCR。 这里强烈推荐NEB的内切酶,还记得在有一次用别家的酶切过夜,结果质粒都被切碎了(当然当时质粒浓度也不高),而用NEB的酶,切个七十二小时仍旧一切OK,尤其现在NEB还推出了HF的内切酶,没有星活性而且统一都用Buffer4,很好用,在国内我都用TAKARA的酶,基本上还可以。注意要读说明书,选用什么buffer,多少度,用不用加BSA,这些都要仔细读。 酶切的起始量,PCR产物没甚么可说的,全都切上,如果是从质粒上切片
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