端粒酶活性实时定量PCR法检测试剂盒(小鼠)

特别提示：包括端粒酶活性实时定量PCR法检测试剂盒(小鼠)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：端粒酶活性实时定量PCR法检测试剂盒(小鼠)
产品货号：KFS309
产品规格：20T|50T

端粒是真核生物染色体末端特殊的DNA-蛋白结构，含多个重复序列（5’-TTAGGG-3’），端粒结构的形成和功能的维持需要端粒结合蛋白的直接或间接参与。端粒酶是细胞体内一种核糖核蛋白复合体，是由RNA 和蛋白质亚基组成的一种特殊的逆转录酶，其可以利用自身的RNA 模板合成末端DNA，并添加到染色体末端以克服末端序列的丢失，从而使细胞获得增殖能力。

端粒酶蛋白催化亚基（TERT 或TRT）具有反转录酶的主要特征，其表达在正常细胞中受到抑制，研究表明，TERT或TRT 的表达与端粒酶活性的表达一致，与端粒酶的活化程度密切相关。Wisman 等在人卵巢癌中利用逆转录PCR 检测hTERT 的mRNA 的表达，并采用TRAP 法检测端粒酶活性，结果证实二者均存在于恶性肿瘤中并且表达模式相同。基于上述原理，我司实时荧光定量PCR 端粒酶检测试剂盒通过检测TERT 的mRNA 表达水平来间接反应端粒酶的活性。

实时荧光定量PCR（SYBR Green Real-time PCR）方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域，使用本试剂盒可以准确简便地进行mRNA 的表达分析。试剂盒采用SYBR Green qPCR Master Mix 为荧光实时定量PCR 和Two-Step 荧光实时定量PCR 设计的最优反应体系，并结合特异性的细胞端粒酶催化亚基基因TERT 引物，简化实验步骤和提高实验效率。Master Mix 含有Maxima Hot Start Taq DNA 聚合酶、dNTPS、进行优化处理的PCR 反应缓冲液以及SYBR Green 染料。使用Hot Start Taq DNA 聚合酶，为PCR 反应提供了更高的产量和灵敏度、特异性，能够检测低至10 个拷贝的目的基因。

本试剂盒可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对细胞基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。只需加入样品DNA 模板，反应即可进行。

适应于大多数的Real-time PCR 扩增仪，包括Applied Biosystems，Eppendorf，Corbett，Bio-Rad，Roche，杭州博日（Line-GeneBioer）等品牌的PCR 扩增仪。

除了端粒酶活性实时定量PCR法检测试剂盒(小鼠),，我公司还供应以下相关产品：



名称：中pH缓冲液套装
货号：BTN100829
规格：30次
Native-PAGE，非变性聚*烯酰胺凝胶电泳是目前电泳法分离非变性蛋白质的主要方法，实验过程杜绝变性剂接触目的蛋白质，常用于同工酶的鉴定和提纯。本产品可快速制备分离胶，不含SDS，并确保配制分离胶的精确pH值。

产品组成：

成份	规格(30次*)
4×浓缩胶配胶液(pH5.5)	100ml
4×分离胶配胶液(pH7.5)	200ml
中pH电泳液(pH7.0)	10L(干粉)
5×中pH上样液	1ml
使用手册	1份

*注：1次是指的一次mini-Gel电泳

储存条件：常温运输及保存(5×中pH上样液需要-20℃保存)，有效期为一年。

名称：SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒
货号：KFS075
规格：50 块胶
SDS-PAGE 凝胶配快速制试剂盒提供了配制SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE 凝胶。

本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、SDS 等预混合成下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)，简化了凝胶配制的步骤。下层胶缓冲液中含Tris pH8.8 及适量SDS，上层胶缓冲液中含Tris pH6.8 及适量SDS。

本试剂盒约可配制50 块常规大小的PAGE 胶(即聚*烯酰胺凝胶)。

注意事项
1. 过*酸铵配制成10%溶液后，应尽快用完并-20℃保存，若4℃放置则不要超过一个星期。尽量现配现用。
2. TEMED 宜挥发，使用后请盖紧瓶盖，并保证避光保存。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED 的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3. 温度较低时，下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)中的SDS 可能析出。需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存：4℃，有效期12个月。

名称：4%-20%梯度预制胶，12孔
货号：SY0371
规格：1盒（10块）
本品通过pH中性缓冲液制备，*烯酰胺与甲叉*烯酰胺配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶4-20%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔最大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

蛋白电泳经常使用聚*烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的*烯酰胺单体和N,N-亚甲基双*烯酰胺（甲叉*烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（*烯酰胺/甲叉*烯酰胺：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过*酸铵：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法
1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%），也可使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%*醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。也可以使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360），无需添加*醇，无需冰浴，但是需要另行添加20%乙醇，恒压50V电转60 min。

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项
1) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如*烯酰胺和甲叉双*烯酰胺有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3) 电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸。
5) 拔掉梳子后，如果偶尔出现胶齿不直的情况，可用注射器针头将胶齿拨正。
6) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满意缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。