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- 百奥莱博
- YT477-MTI
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
84
- 英文名：
N-mCherry plasmid（with CMV promoter）
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1μg
特别提示：包括N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
英文名称：N-mCherry plasmid（with CMV promoter）
产品货号：YT477
产品规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含mCherry (DsRed的突变体，一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mCherry的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| mCherry | 677-1384 |
| Multiple cloning site | 1385-1474 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1494-1515 |
| SV40 polyA signal | 1527-1910 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2048-2354 |
| bla promoter | 2379-2503 |
| SV40 promoter | 2523-2861 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2896-3687 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3688-4146 |
| pUC origin | 4275-4942 |
本质粒(4994bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
除了N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白),，我公司还供应以下相关产品：
名称：cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)
货号：BTN90407C
规格：5μg
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA，是一种常见的DNA底物，分子量为31.5×106Da/48502bp，浓度为200～500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。
储存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM
储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。
纯度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。
名称：遗传霉素(G418)干粉
货号：BTN100838
规格：100mg
G418又叫Geneticin(遗传霉素)，分子式为C20H40N4O10·2H2SO4，分子量为692.71，CAS号为108321-42-2，白色结晶，溶于水。在分子遗传试验中,是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。
结构式：
抗性机制：它通过干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成，对原核和真核细胞都有毒性。真核细胞中表达细菌APH(氨基糖苷磷酸转移酶)的基因(源自Tn5)，可使G418失去作用。
储存条件：常温运输，4℃避光保存、有效期一年。
名称：N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)
货号：YT476
规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个EGFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| EGFP | 677-1393 |
| Multiple cloning site | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 205-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
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文献和实验要怎么保存 zjubell 剪下来。TE融解，再就好跟感受态去做转化了。再挑单克隆，再培养多点，再提质粒鉴定。 这样就保种保好了。既有质粒，也有菌液。 zhangyuxianggx 谢谢！pcDNA3-mCherry也用同样的方法溶解下来吗？然后怎么保存？能否详细解释一下pcDNA3-mCherry是什么 nono1986 pcDNA3-mCherry意思是：带有mCherry(红色荧光蛋白
前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前（1999年）由Davis发明，并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发，特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今，已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签，目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性，使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签
:分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为，均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP而言，相对于GFP，其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白，可以和GFP系列荧光蛋白共用，实现多色标记体内、外实验表明，mCherry在N端和C端融合外源蛋白时，荧光蛋白活性和被融合
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