LDH细胞毒性检测试剂盒

特别提示：包括LDH细胞毒性检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：LDH细胞毒性检测试剂盒
产品货号：HR8308
产品规格：500T/1000T



除了LDH细胞毒性检测试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒
货号：YT123
规格：100次
本试剂盒是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。本试剂盒足够检测100个细胞样品。

试剂盒组份：
台盼蓝染色液(2X)————10ml
细胞重悬液———————100ml

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：凋亡细胞富集试剂盒
货号：SNM506
规格：20T

名称：DNA ladder检测试剂盒
货号：SNM522
规格：100T|50T|20T

名称：Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒
货号：KFS208
规格：100T|50T
凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中，响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切，继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬氨酸残基，剪切发生在序列的羰基段。

Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用新型的荧光底物为原料，可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4氨基的小肽（DEVD）和一种核酸结合染料。凋亡发生时，caspase3/7蛋白被激活，从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后，游离的核酸染料与DNA结合，从而发出亮绿色荧光信号。

操作步骤
1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞，加入合适的化合物或药物，刺激细胞诱导凋亡。
1.2 去除药物或化合物，以新鲜培养基洗涤细胞2-3次，更换新鲜培养基后，以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液，使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。（注意： Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM，您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。）
1.3 37℃，避光孵育30min，或室温孵育45-60min。
1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。

名称：细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)
货号：SY0474
规格：20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。