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- 详细信息
- 文献和实验
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313
- 英文名:
HotStart UltraTaq DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别提示:包括热启动UltraTaq DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:热启动UltraTaq DNA聚合酶
英文名称:HotStart UltraTaq DNA Polymerase
产品规格:250U
本制品是UltraTaq经化学修饰处理后的制品。经处理后的Taq 酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由 引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。Hot Start UltraTaq DNA聚合酶在PCR反应最初的DNA变性时间延长到10分钟即可 恢复活性。本制品适用于高特异性PCR反应、Mutiplex PCR、高GC含 量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组 扩增检测。与普通的热启动Taq酶相比,本品具有延伸时间更短,产量更高,保真性比普通Taq提高了一倍。
产品组成:
| 组份 | JN0026-250U |
| HotStart UltraTaq 聚合酶(5U/μl) | 50μl |
| dNTP混合液(各10mM) | 200μl |
| 10×HotStart UltraTaq Buffer with Mg2+ | 2ml |
产品特点:
1、简便:与目前最有效的热启动酶条件一致,无需改变实验条件。
2、快速:扩增速度为普通Taq的4倍,72℃时10-15s可延伸1kb以 上。
3、高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
4、高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
产品用途:
1、高特异性PCR反应;
2、复杂模板扩增;
3、Multiplex PCR;
4、基因组扩增检测;
5、荧光定量PCR。
应用实例:
图例一)使用 HotStart UltraTaq DNA 聚合酶进行的荧光定量PCR。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单 一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
常用反应体系(50μl)
| 10× HotStart UltraTaq Buffer | 5μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| HotStart UltraTaq | 0.25μl(1.25U) |
| ddH2O | 至50μl |
| Mg2+终浓度为2mM | |
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如 Ace Taq ,预变性 95℃5 - 10 min 即可
Polymerase Chain Reaction--热启动PCR
This procedure is a "hot start" PCR cycle for use with large primers. PCR mass-produces DNA contained in the source plasmid between the two primer-binding sequences, eventually producing linear DNA starting with Primer 1, continuing
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 根据不同的实验目的选择最合适的酶, 克隆普通长度的目的DNA 片段:Taq、Taq Plus 保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、Taq Platinum 高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:Long Taq、Taq Plus 扩增基因组模板,需要降低背景:Hotstart Taq、Taq Platinum
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