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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pY016 (pCDNA3.1-hLbCpf1)哺乳编辑质粒
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
厂家 载体pCDNA3.1 Transheep 大肠杆菌菌株DH5α Tiangen 限制性内切酶 Fermentas T4连接酶 Fermentas 质粒DNA小,大量抽提试剂盒 Axygen 凝胶
NaCl溶于90ml ddH2O,加入1M Hepes,调pH到7.4,补ddH2O至100ml,pH7.4,滤过除菌。2、核酸贮存液,过滤除菌。3、培养基:含血清或不含血清的,用于转染细胞的正常培养。二、操作步骤(一)克隆目的基因1、根据GenBank检索的目的基因序列,设计扩增引物,并在上、下游引物的5’-端分别引入酶切位点BamHⅠ和XhoⅠ,行RT-PCR。2、回收特异性扩增片段,连入T载体。3、转化DH5α,质粒制备。4、酶切初步鉴定,测序证实。(二)真核重组表达载体的构建:pcDNA3载体
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