Cos-7 非洲绿猴sv40转化的肾细胞

Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南

Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南 　　Vero细胞由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita从正常成年非洲绿猴肾脏建株，1964年带到NIH时已传至第93代，是目前科研中广泛使用的经典细胞系。 　　细胞特性与应用场景 　　该细胞应用广泛，可用于Vero毒素检测、绞牛肉中的病毒检测、功效测试、疟疾研究、培养基测试和支原体检测，也是一种合适的转染宿主和疫苗生产常用细胞。 形态特征与生长方式   　　贴壁生长，呈上皮细胞样（卵圆形或多边形），贴壁依赖性较强，传代时需用胰酶充分消化，一般消化

vero（非洲绿猴肾细胞)的传代

传代步骤比较传统：倒掉培养液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培养基－>用吸管吹打均匀－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。我的体会是：1、消化时间和实验环境温度也有很大关系，我们实验室条件比较差，不能维持恒温（不过我想大部分实验室目前也还是做不到的）。夏天的时候，消化特别快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以，经验很重要，如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断，首先效率太低，而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶，当感觉到有些泛白，瓶角有少许细胞

cos-7的转染

问：cos-7的转染1、细胞的培养：我们在培养细胞时发现该细胞长的很快，不到2天的时间就长满了；消化的时候老是成块的掉，如果消化时间加长，细胞也能成单个的，但是细胞的生长力又减弱了，请问要怎样来克服这一问题呢？2、转染前：转染前16-24h我们用含血清不含抗生素的MEM传进6孔盘，16h左右就发现细胞贴壁了，但是形态没有以前好，并且漂死细胞相当多。最初我们都以为是细胞没有贴壁，又把细胞放进培养箱，结果死细胞越来也多，请问是不是因为没有抗生素所以细胞才很容易死，并且形态不好的呢？3、转染：在6孔