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文献和实验Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南 Vero细胞由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita从正常成年非洲绿猴肾脏建株,1964年带到NIH时已传至第93代,是目前科研中广泛使用的经典细胞系。 细胞特性与应用场景 该细胞应用广泛,可用于Vero毒素检测、绞牛肉中的病毒检测、功效测试、疟疾研究、培养基测试和支原体检测,也是一种合适的转染宿主和疫苗生产常用细胞。 形态特征与生长方式 贴壁生长,呈上皮细胞样(卵圆形或多边形),贴壁依赖性较强,传代时需用胰酶充分消化,一般消化
传代步骤比较传统:倒掉培养液->PBS洗2遍->胰酶0.25%消化->倒掉胰酶->加培养基->用吸管吹打均匀->分瓶->放置37度,5%CO2孵箱。我的体会是:1、消化时间和实验环境温度也有很大关系,我们实验室条件比较差,不能维持恒温(不过我想大部分实验室目前也还是做不到的)。夏天的时候,消化特别快。但是到了冬天,就很慢,要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以,经验很重要,如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断,首先效率太低,而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶,当感觉到有些泛白,瓶角有少许细胞
考虑的问题之一。 Vero细胞的正式名称为“非洲绿猴肾细胞”,是传代细胞的一种。所谓传代细胞可简单的理解为,在体外可以连续传代的细胞系,理论上具有无限传代的寿命。传代细胞系可以通过以下方法衍生而来,(1)正常细胞群的连续传代,繁衍成一个新的具有无限寿命的细胞群,例如非洲绿猴肾细胞的传代细胞系Vero细胞;(2)人或动物肿瘤细胞的原代细胞的系列培养,例如Hela细胞、Namalva细胞等;(3)携带致癌基因的病毒,将致癌基因转化给正常细胞,成为肿瘤细胞,例如EB病毒转化的B淋巴细胞;(4)骨髓瘤细胞
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