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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 细胞类型:
I类
- 品系:
优良品
- 组织来源:
ATCC来源
- 物种来源:
ATCC来源
- 细胞形态:
贴壁
- 器官来源:
ATCC来源
- 运输方式:
常温运输或冻存干冰运输
- 年限:
3~5代
- 生长状态:
优良
- 规格:
5×106cells/T25细胞培养瓶
产品规格:5×10^6cells/T25细胞培养瓶
生长条件:
| 培养条件 | 具体培养基条件请咨询我们 |
| 温度 | 37℃ |
| 空气条件 | 5% CO2,95% AIR |
| 传代方法 | 1:2传代,2~3天换液 |
| 冻存条件 | 90%FBS+10%DMSO |

MuM-2C人眼脉络黑色素瘤细胞,使用方法
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
MuM-2C人眼脉络黑色素瘤细胞,细胞传代:收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓冲,待细胞恢复基本生长状态后,进行后续细胞实验。在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
(一)细胞未长至 85%时,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,吸去剩余培养液,只留 6-8ml 培养液继续培养。
(二)细胞已长满(达 85-95%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1.弃去培养液,用 PBS 洗涤 1-2 次,
2.加入 1.0ml 胰酶消化液,37℃消化,显微镜下观察细胞消化情况,若细胞回缩变圆、透亮、轻拍甁壁呈流沙样脱落,则迅速拿回操作台,加入双倍的含 10%血清的完全培养液,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液,
3.将细胞收集于离心管中离心 1000rmp/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散,
4.加入新鲜培养液重悬细胞,进行传代、冻存,
5.如果没有特别说明,建议收到细胞后的第一次传代比例为 1:2。
MuM-2C人眼脉络黑色素瘤细胞,常见问题及解决方法:
1、观察细胞密度最好用(4X物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察;
2、瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养;
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心重悬后接种到新瓶内;
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们联系。
5、培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
6、细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察,
7、如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 8-10ml 培养液培养观察,细胞生长至汇合度 85-95%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁, 将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我 们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
8、细胞消化铺板,细胞死亡较多。 第一消化时间掌控好切勿消化过度,第二终止要完全(以T25瓶为例,加1ml胰酶用5ml完全培养基终止),第三控制吹打次数和力度,避免损伤。
我公司代理销售ATCC来源,sciencell来源,上海细胞库来源等细胞销售,另我公司有自建细胞库,生产培养各类细胞系,采用灌注法制备各种原代细胞。
欢迎新老客户咨询订购:MuM-2C人眼脉络黑色素瘤细胞
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文献和实验凹,除其边缘部分外,大部分区域只有视锥细胞而无视杆细胞,故为感光最敏锐的部分。人的视网膜约厚 0.1~ 0.5毫米,在组织学上将其分为 10层,其中主要由 4层细胞组成。由外向内依次为色素上皮细胞层、视细胞层、双极细胞层及神经节细胞层。 色素上皮细胞层:紧靠脉络膜,为一层单层上皮细胞,胞体内含有丰富的色素颗粒,并有胞突伸入至视细胞之间的间隙内。当强光照时,色素颗粒进入突起内,以保护视细胞不致接受过分强光的刺激;而当弱光时,色素颗粒退缩于细胞体内,使视细胞
"或"厉疽",其发生由于风邪搏于血气,变化所生;或脉络之血,滞于卫分,阳气束结而成;肾中浊气混于阳,阳气收束所致,和血凝气滞等因素有关。《诸病源候论·黑痣候》谓:"有黑痣者,风邪搏于血气,变化生也。夫人血气充盛,则皮肤润悦,不生疵瘕。若虚损则黑痣变生。"《外科正宗·黑子》中日:"黑子,痣名也。皮肾中浊气混浊于阳,阳气收束,结成黑子,坚而不散。"这些论述表明,恶性黑色素瘤之基本病因乃在虚损的基础之上,或外邪搏于血气,或阳气束结而致血瘀气滞。瘀血结聚,乌黑肿块。瘀久化热,热毒瘀阴,则色红溃烂,流污黑血水。虚
放射状排列的肌纤维为瞳孔开大肌,受交感神经支配,收缩时使瞳孔开大。后层细胞较大,呈立方形,胞质内充满色素颗粒。 图18-5 人眼球的虹膜 HE×200 4.睫状体 睫状体(ciliary body)位于虹膜与脉络膜之间,前段肥厚并伸出放射状的睫状突,后段渐平坦,终止于锯齿缘。睫状体由睫状肌、基质与上皮组成(图18-1)。睫状肌为平滑肌,密集分布于睫状体的外2/3区域。肌纤维的排列有三种方向:外侧的纵行纤维紧靠巩膜走行,前端附











