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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
253
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100T(2×250μl)
特别提示:包括250bp DNA ladder(250~5000bp)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:250bp DNA ladder(250~5000bp)
产品货号:RFT006
产品规格:100T(2×250μl)
本产品是由9条带状双链DNA组成的即用型DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。9条带包括250,500,750,1000,1500,2000,2500,3000,5000bp,其中1500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8~10cm,电泳电压4~10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
除了250bp DNA ladder(250~5000bp),,我公司还供应以下相关产品:
名称:红色DNA上样液(6×,非甘油)
货号:BTN130958A
规格:10mL
名称:三合一RNA上样液(B型,6X)
货号:BTN3130B
规格:1.5mL
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。
产品特点:
1.能提高RNA上样速度,免去繁琐的准备步骤,减少污染。
2.其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性,保证电泳过程中RNA的完整性。
3.所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料),便于直接上样和UV观察RNA电泳条带,免去染色和脱色过程。
4.本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 三合一RNA上样液 | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
本产品为红色液体,含红色的EB(溴化乙锭),有致癌性,避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。
储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
注:本产品含EB,所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果,RNA 条带成红色。
疑难解答:
Q:为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A:这是因为在非变性胶中,即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳,而在变性胶中,完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动,所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况,非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。
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文献和实验;还有一个原因是你设置的电压太高,最好是2~4v/cm,跑4~6小时比较合适(2)“我是按说明书上0。8%的琼脂糖”:凝胶浓度太低了,把凝胶浓度加大到2%,放心做,没问题的(3)“说明书上说混合温和”:那是怕你混匀太剧烈导致细胞基因组DNA断裂啊,注意很轻轻的混匀(4)“收集凋亡细胞时离心时转速”:我在实验室中是5000rpm,离心5min,我觉得足已mmyycc :我的ladder总是只有一条带,与对照组差别不大,用的是100v,1-1.5h,不知道是不是这个原因?溴酚兰跑到什么位置合适
(2)“我是按说明书上0。8%的琼脂 糖”:凝胶浓度太低了,把凝胶浓度加大到2%,放心做,没问题的 (3)“说明书上说混合温和”:那是怕你混匀太剧烈导致细胞基因组 DNA断裂啊,注意很轻轻的混匀 (4)“收集凋亡细胞时离心时转速”:我在实验室中是5000rpm,离心5min,我觉得足已 mmyycc :我的ladder总是只有一条带,与对照组差别不大,用的是100v,1-1.5h,不知道是不是这个原因?溴酚兰跑到什么位置合适呢? chujun_hust
发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180~200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。 一、材料与试剂 凋亡细胞; 蛋白酶K(500μg/ml) 8mol/L 醋酸钾 白细胞裂解液:pH8.0,10mmol/L Tris-HCl,10mmol/L NaCl,10mmol/L EDTA,1% SDS。 氯仿 无水乙醇,70%乙醇; 2%琼脂
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