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文献和实验逆转录反应,作为分子生物学研究的基本技术之一,已经广泛应用到多个研究领域,可以说是科研人员进行 RNA 功能研究的看家本事。 众所周知,逆转录的应用领域有以下 6 种: 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 定量RT-PCR(RT-qPCR) cDNA 克隆和文库构建 cDNA 末端快速扩增(RACE) 基因表达芯片 RNA 测序(RNA-Seq) 今天,小编就整理了一些贴士,帮助大家在面对 6 种不同的应用时,如何正确选择逆转录酶。 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 在 RT-PCR
简介:什么是PCR芯片? 实时定量PCR是检测基因表达最灵敏,最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因,因此,每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则工作量巨大,耗时长久。 通过简单的,经过优化的实时定量PCR体系,如SuperArray的RT2ProfilerTM
素,或将耐药菌分型,然后在临床上针对不同的亚型,使用相应的抗生素来改善治疗效果。 国外已开始使用生物芯片技术来检测耐药菌基因的变异情况,即检测耐药基因。检测的方法,一是可以利用表达谱芯片检测药物诱导的基因表达变化来分析其耐药性;二是可利用寡核苷酸芯片检测基因组序列的亚型或突变位点,从而分析其耐药性。如MichaelWilson等采用基因芯片技术检测到肺结核杆菌中脂肪酸合成酶Ⅱ、fbpC、efpA、fadE23、fadE24和ahpC基因发生了改变,这些改变与其耐药性有关。 用生物芯片技术可以同时检测
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