Gram-Twort革兰染色液

特别提示：包括Gram-Twort革兰染色液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Gram-Twort革兰染色液
产品货号：GL2247
产品规格：4×100ml

用途：
组织切片的革兰氏细菌染色

注意事项：
Gram-Twort革兰染色液采用非经典的革兰染色配方， 用到红色和绿色染料，使色彩较为丰富，背景干净，胞核胞质对比强烈，细菌染色特征典型，多用于组织切片的染色。

储存条件：室温，避光，12个月

除了Gram-Twort革兰染色液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：活细胞核染料*啶橙
货号：KFS145
规格：25mg
*啶橙是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA 和RNA 结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA 结合量少发绿色荧光，与RNA 结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA 和RNA 染色。

在荧光显微镜下观察，*啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。*啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。*啶橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染，因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

用于细胞核染色时，推荐的*啶橙工作浓度为0.1%。一般孵育条件是室温避光15 分钟。由于不同细胞对*啶橙的摄取能力不同，该法不一定适用所有细胞。

储存：-20℃，避光，有效期12月。

名称：革兰氏染色试剂盒
货号：HR8327
规格：200ml
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙*脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

储存条件：室温密封保存。
有效期：一年。

产品特点：
快速革兰染色液可缩短染色时间，通常经过初染-媒染-脱色-复染四步，整个染色过程只需5分钟，不容易造成假阳性和假阴性，能够准确鉴别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，具有操作简便、方法可靠，试剂性质稳定、保质期长，结果易于观察等特点。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 玻片●染缸 ● 滴管 ● 光学显微镜

使用方法：
1．涂片：
液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm 左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。
2．晾干：让涂片在空气中自然干燥。
3．固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
4．染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加初染液，染1min。
5．水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
6．媒染：滴加1 滴媒染液，染1min，水洗。
7．脱色：吸去残留水，滴加脱色液脱色20-30s，将玻片不停摇动，至流出液无紫色，立即水洗。
8．复染：滴加复染液复染3-5min，水洗。
9．结果观察。

结果分析：
革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色

注意事项：
1．标本涂片不能太厚。较厚的涂片应延长脱色时间。
2．固定时通过火焰的温度不能太高。
3．脱色剂脱色是革兰氏染色的重要步骤，如脱色过度则阳性菌误染成阴性菌，如脱色不够，则阴性菌误染成阳性菌，脱色时间要掌握好。
4．在实验中如果出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度，造成细胞壁通透性的改变，而出现假阴性结果；另外，细胞培养时间太长，可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶，也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。