凝胶阻滞分析(EMSA)试剂盒

非放射EMSA实验技术讨论

EMSA是一个比较复杂的试验技术,由于工作原因接触这个试验技术到现在也有三年多的时间了,做了大概也有几百次吧, 那倒理想的试验结果的同时也碰到了很多莫名的问题和结果,到现在为止还有没有解决的,找不到原因的一个问题,呵呵! 现和smalldonkey商量一下将我对这个实验技术的总结和一个心得写出来给大家分享,批评指正。EMSA实验技术作为一个经典的DNA/protein,RNA/protein的检测技术,不是很多简单的实验技术可以替代的! 比如曾经在我们这个论坛中有站友提到

电泳迁移实验(EMSA)方法

。 5. 电泳分析：EMSA的典型分析结果可以参见下面的图1。 图1. 一个典型的EMSA/Gel-Shift分析图 1，阴性对照反应（标记探针）；2，常规反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针）；3，探针冷竞争反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针）；4，突变探针的冷竞争反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针）；5，Super-shift反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异

EMSA(PROMEGA)

凝胶迁移实验 以下问题是以Promega公司试剂盒为例。 [InstallDir_ChannelDir]mob/72360.shtml 1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？ 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变