- ￥180 - 240
- 凯基
- 江苏
- KGDN20-H
- 2026年11月03日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 供应商：
臻诺生物
- 规格：
100 μl
KGDN20-H 人 GAPDH 上、下游引物 (10μM)（Realtime-PCR）｜KGEMC 凯基
人源 GAPDH 经典 qPCR 内参引物，上下游预混 10 μM，SYBR Green 荧光定量专用
✅ 核心参数
- 货号：KGDN20-H
- 品牌：KGEMC（KeyGEN 凯基）
- 基因：GAPDH（甘油醛 - 3 - 磷酸脱氢酶，人）
- 适用：Realtime-PCR /qRT-PCR 荧光定量
- 浓度：10 μM，上下游引物预混液
- 模板：人 cDNA（人细胞、人组织样本）
- 溶剂：DNase/RNase-Free 无酶水配制
- 储存：-20℃避光保存，避免反复冻融；常温快递，收货后转入冰箱
- 验证：经过 qPCR 验证，扩增效率稳定，无非特异性扩增，适配 2⁻ΔΔCt 相对定量
📌 适用场景
人源细胞 / 临床组织 qRT-PCR、基因表达差异分析、细胞功能、肿瘤、药理临床样本定量实验
KGDN20-H 人 GAPDH 上、下游引物 (10μM)（Realtime-PCR）｜KGEMC 凯基
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文献和实验TaqI酶切后，如为Allele Ⅰ，则消化为135和114bp两条片段，如为Allele Ⅱ，则不能被酶切，仍为249bp。如为杂合子AlleleⅠ/Ⅱ。则电泳条带为249，135，114三个条带。本实验证实4h消化后Allele Ⅰ均能被酶切完全，不存在假阳性结果。 IL-10基因上-592C/A基因型的检测：上游引物：5’-CAACTTCTTCCACCCCATCTTT-3’下游引物：5’-GTGGGCTAAATATCCTCAAAGTT-3’；PCR参数: 95℃预变性2 min，35个循环
，以保证探针的特异性，如下图所示： 上游引物 下游引物ⅡT7 启动子序列 下游引物Ⅰ (2)PCR 先用上游引物和下游引物Ⅰ进行PCR，再以PCR 产物为模板,用上游引物和下游引物Ⅱ-T7进行二次PCR(具体操作参见PCR章节)。 (3)探针合成标记与纯化 在0.5ml 离心管中加入下列试剂： RNasin （40U/μl）0.5μl GACU POOL GAC （含GTP、CTP、ATP各2.75 mM,UTP 61μM）2μl [α-32P]UTP(10μCi
61μM） 2μl [α-32P]UTP(10μCi/μl) 2.5μl DTT (二硫苏糖醇，0.1M) 1μl 5×转录 buffer 2μl 模板（50ng/μl） 1μl T7 RNA 聚合酶 (15U) 1μl 混合后，短暂离心，37OC保温1hr。 加入DNaseⅠ（10U/μl）1μl, 37OC 15min, 然后75 OC 10min以灭活DNAseⅠ和T7 RNA 聚合酶。 加入：饱和酚 50μl 氯仿 50μl 酵母
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