结晶紫染色液

附录I 染色液的配制

fuchsin) 0．3g 　　95%酒精 10ml 　　B液：石炭酸 5．0g 　　蒸馏水 95ml 　　将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A液。 　　将石炭酸溶解于水中，配成B液。 　　混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。 　　三、革兰氏 (Gram)染色液 (实验7) 　　1．草酸铵结晶紫染液 　　A液：结晶紫

常用染色液和试剂的配制

四、醋酸洋红染液  将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中，边煮边搅拌，煮沸(沸腾时间不超过30s)，冷却后过滤，即可使用。也可再加入1%～2%铁明矾水溶液5-10滴，至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时，可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴，至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇)：硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中，溶解后过滤备用； ②醋酸钠缓冲液：醋酸钠・3H2O 9.7g，巴比

结晶紫染色测定细胞数

孔 6 个， 3 个阳性对照孔各加 0.1ml 含 4 μ g TNF 的 RPMI-1640 培养液， 3 个阴性对照孔各加 100 μ l RPMI-1640 培养液。继续培养 18 ～ 24 小时。 3． 甩去培养液，用 PBS 小心洗涤一次，每孔加 0.1ml 10 ％甲醇溶液固定细胞 30 秒钟。 4． 吸去甲醇溶液，每孔加 0.1ml 结晶紫染液，室温中放置 20 分钟。 5． 轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或 37 ℃烘干