SDS-PAGE电泳液（干粉）

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

文献对我很有启发，其中有些技术原理方面的内容如下：在含SDS缓冲液的样品中，小分子多肽的浓缩是较困难的，因为小分子多肽与SDS形成的复合体具有与SDS本身类似的电荷和大小，所以偏离了相对迁移率和分子质量对数的相互关系，因此浓缩对于小分子多肽的SDS-PAGE来说就成了一个突出问题。于是回去翻了翻自己曾经偶然跑出来的条带的模样，给我的感觉就是压缩的不好，然后还有弥散的现象（就是那种蛋白晕开的模样，例如这条带下面的波浪边缘，当然也可能是胶不均匀的原因吧，反正我当时就觉得是弥散的现象）然后我就突然有种

做 WB 要了解的有关 SDS-PAGE 的基本知识

的 SDS-PAGE 的相关知识。（PS：附带一张简单明了的 DNA 印迹、RNA 印迹及蛋白质印迹流程图～～）一、配胶、制胶首先 SDS（十二烷基硫酸钠，一种阴离子洗涤剂）能使蛋白变性，并使所有蛋白质颗粒表面覆盖一层 SDS→使蛋白均匀地带上负电荷→从而使质量相似但形状或电荷不同的蛋白在电泳液中能以相似的速度进行迁移→→因此 SDS 被加到凝胶溶液、蛋白样品和电泳液中，以确保蛋白在整个过程都展开并保持负电荷。其实所谓的凝胶，其本质是聚丙烯酰胺。过程中，多格聚丙烯酰胺分子相互交联，最后形成一个蛋白

【专题讨论】Tricine-SDS-PAGE胶的使用方法与心得（可分离8KD--280KD）

先说一下Tricine胶的好处。 Tricine胶比较容易将样品压平，具体原因我也没有搞清楚，但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直，同样，显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比，Marker扩散没有那么厉害，各泳道条带间隔明显，不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。 Tricine-SDS-PAGE胶的配方：（我一直用的就是10%这个浓度，把8KD和280KD都做出来了） 分离胶 积层胶 ddH2O 1.85 mL