KGAV113 Annexin V-kFluor647/PI

KGAV113 凯基 KeyGEN Annexin V-kFluor647/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒

货号：KGAV113（10T）；KGAV114（20T）；KGAV115（50T）；KGAV116（100T），科研专用，远红通道凋亡试剂盒，适合多色流式方案，kFluor647 为凯基自研远红荧光染料，光谱等效于 APC/Cy5，可兼容 640nm 激光器凯基生物

📦实物包装与组分

适用样本：贴壁 / 悬浮培养细胞；不推荐直接组织块

 

仪器：流式细胞仪（配备 640nm 激光器，FL4 通道采集 kFluor647；PI 用 FL3 通道）；也可荧光显微镜观测凯基生物

🧪检测原理

1. Annexin V‑kFluor647：Ca²⁺依赖磷脂结合蛋白，特异性结合凋亡早期外翻的磷脂酰丝氨酸 PS；kFluor647 远红荧光，Ex/Em：650/665nm，荧光亮度高、背景低，与 FITC、PE 通道串色极小，多色流式
2. PI 核酸染料：无法穿透完整活细胞膜；晚期凋亡 / 坏死细胞膜破损后进入细胞结合 DNA，标记死细胞。

四象限判读（X 轴：Annexin V-kFluor647；Y 轴：PI）

• Q4：Annexin V⁻/PI⁻ → 活细胞
• Q3：Annexin V⁺/PI⁻ → 早期凋亡
• Q2：Annexin V⁺/PI⁺ → 晚期凋亡 / 坏死
• Q1：Annexin V⁻/PI⁺ → 裸核、细胞碎片

总凋亡率 = Q3 早凋 + Q2 晚凋

📝标准操作步骤（凯基原厂）

1. 收集细胞：贴壁细胞使用无 EDTA 胰酶消化，务必收集上清漂浮凋亡细胞；300 g，4℃离心 5 min。
2. 预冷 PBS 洗涤细胞 2 次，300 g 离心。
3. 1×Binding Buffer 重悬，调整细胞浓度至 1×10⁶ cells/mL。
4. 取 100 μL 细胞悬液（约 1×10⁵细胞）加入流式管。
5. 加入 5 μL Annexin V-kFluor647 + 5 μL PI，轻柔混匀。
6. 室温避光孵育 5~15 min。
7. 补加 400 μL 1×Binding Buffer，1h 内流式上机。