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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 供应商:
凯基生物
- 保存条件:
低温
凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用) 现货供应KGA7051
凯基 KeyGEN KGA7051 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(FITC 标记 POD 法,通用)
✅检测原理(双模式)
- 荧光模式:Streptavidin-FITC 结合生物素,凋亡细胞核发绿色荧光,荧光显微镜观察
- POD 显色模式:抗 FITC-POD(HRP)结合 FITC,DAB 底物显色,凋亡核呈棕黄色,普通光学显微镜拍照计数
正常 / 增殖细胞几乎无 DNA 断裂,极少被标记,背景低,适合组织原位凋亡定位与形态观察
📦试剂盒组分
- Proteinase K(50×)
- TdT 酶
- Biotin-dUTP
- 反应缓冲液
- 封闭液
- Streptavidin-FITC / 抗 FITC-POD 抗体
- DAB 显色液(POD 法用)
- 阳性对照玻片、阴性对照配套试剂
- 洗涤缓冲液
🧊储存条件
🧪简要实验流程(石蜡切片为例)
- 切片脱蜡至水,蛋白酶 K 通透处理,PBS 漂洗
- TdT 酶 + biotin-dUTP 反应液,湿盒 37℃孵育,PBS 洗涤
- 二选一:
- 荧光法:加 Streptavidin-FITC,避光孵育,封片,荧光镜检
- POD 法:抗 FITC-POD 孵育 → DAB 显色 → 苏木素复染,脱水封片,光镜观察
- 设置阴性对照(不加 TdT 酶)、阳性对照用于判读结果
✨产品亮点
⚠️关键注意事项
- TdT 酶极易失活,全程冰上操作,试剂避免反复冻融
- 蛋白酶 K 通透时间需要预实验优化,过度通透会提升背景
- POD 法 DAB 显色要严格控制时间,防止背景棕染过高;荧光模式全程避光
- 切片固定、抗原修复质量直接影响实验成败;组织样本避免核酸酶污染
- 凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用) 现货供应KGA7051
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询价记录
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
产品名称:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类:细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号:A0001c检验方法:Apoptosis包 装:20T产品说明:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V
膜的外侧。Annexin-V是一种35-36KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白,它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时,可以和外翻的PS结合,从而可以检测凋亡的细胞。发生死亡的细胞其细胞膜上的PS也外翻,因而也会阳性。因此,常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外,还会加一种DNA染料,常用的有PI和7-AAD,由于死亡的细胞膜通透性增高,染料可以进入细胞内和DNA结合,从而可以发荧光,区分出死细胞。下图给出的是在使用FAS单抗诱导前后的检测结果,横坐标是Annexin-V FITC,纵坐标是PI
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