组织细胞基因组DNA提取试剂盒

特别提示：包括组织细胞基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：组织细胞基因组DNA提取试剂盒
英文名称：Cells/Tissue genomic DNA extraction kit
产品货号：ALH125
产品规格：50次|100次|200次

本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液，首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过*丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（200次）：
RNase A(10mg/ml)——————400μl
细胞核裂解液————————120ml
蛋白沉淀液—————————40ml
DNA溶解液—————————30ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、氯*等试剂。
2.快速，简捷，组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 用户需自备*丙醇、70％乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织）、0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：组织DNA提取试剂盒|细胞DNA提取试剂盒

除了组织细胞基因组DNA提取试剂盒,组织DNA提取试剂盒|细胞DNA提取试剂盒，我公司还供应以下相关产品：



名称：柱式冻存血液DNA提取试剂盒
货号：BTN120720
规格：50次
血液DNA是重要的研究材料，但是血液DNA在常温下存放的时间很短，因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜，释放出DNA，因此从冻存血液中高效提取DNA一直是个棘手的问题。本产品就是北京我公司开发的专门用于从冻存血液中提取DNA的试剂盒。

产品特点：
1.适用于各种动物血液，包括禽类和昆虫。
2. 微量提取，每次可处理400μL 血液。
3. DNA 完整性好，纯化后长度在20-50 Kb 之间。
4. DNA 纯净，OD260/OD280在1.8-2.0 之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在10μg/mL 血液。
5. 操作简单，整个过程约20分钟，室温操作，适合大规模样品处理。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	20ml
溶液B	20ml
溶液C	100ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1.从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品，室温下静置融化。
2. 将400μL 解冻的血液转移到一个1.5mL的塑料离心管中，加入400μL溶液A，充分震荡混匀。如果是禽类血液，则少加10倍，只加40μL。
3.在混合液中加入400μL溶液B和200μL 氯*(自备)，振荡1分钟。由于离心管比较满，所以需要确保管底溶液转动起来，否则只是液面振动而已。
4. 4℃12000 g离心10分钟，小心将上清转移至一新的1.5mL塑料离心管
中。注意：最好不要室温离心，如果室温离心，则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚，只能得到很少的上清。
5. 将约0.7-0.8mL上清转移到10-15mL塑料离心管中(不要使用玻璃离心管，否则DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可)。
6. 加入2.5倍上清体积的溶液C(2mL)，立即摇晃混匀。
7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次0.7mL左右，转移后静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合，然后室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液，然后再加入0.7mL，重复上述操作，直到全部混合液挂柱。
8.在离心吸附柱中加入0.7mL 通用洗柱液，室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液。
9.在离心吸附柱中再加入0.3mL 通用洗柱液，室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液。
10.室温12000 g离心30秒，去尽残留液体(此步骤十分重要，不要省略，否则残留的含乙醇的通用洗柱液将抑制后续的酶反应)。
11. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管中，加入50μL DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果更佳。
12.室温12000 g离心30秒，离心管底部溶液即DNA溶液，可立即使用或-20℃长期保存。
13. 本产品所用离心吸附柱吸附能力比较强，如果再次用DNA 洗脱液2.0洗脱，还能洗脱下一些血液DNA。

疑难解答：
Q：保存血液样品时温度越低越好吗？
A：不是。Tegelstrom 曾经比较了分别在-70℃，-20℃，4℃保存了6个月的蛙血，发现保存温度越低，血液DNA的断裂越严重。
Q：本产品是否可以用于放量操作？
A：可以在大的离心管中进行放量操作，如每次处理5-100mL 血液，只是客户需要单独购买红细胞裂解液，并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
Q：冷冻血液为何DNA产量很低？
A：冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和细胞核膜，红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失，所以最后得到的DNA是没有被冰晶刺破的细胞的DNA。