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- XY-XB-2222
- 中国/美国
- 2025年08月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 细胞类型：
科研
- 品系：
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- 组织来源：
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- 物种来源：
鼠/人/其它
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 英文名：
T24
人膀胱移行细胞癌细胞_T24培养物污染往往是细胞培养实验室最常遇到的问题，有时会带来十分严重的后果。污染物主要分为两类，一类是化学污染物，另一类是生物污染物。尽管无法彻底消除污染，但是可以通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度。
传授细胞培养基本方法
细胞复苏步骤
一、所需仪器：
1）离心机
2）生物安全柜
3）电动移液器
4）CO2培养箱
5）倒置显微镜
6）液氮罐
7）恒温水浴锅
二、所需试剂：
1）胎牛血清（FBS）
2）无菌1×PBS pH=7.2
3）完全培养基
三、所需耗材：
1）离心管（15ml、50ml）
2）T-25细胞培养瓶
3）一次性无菌移液管（2ml、5ml、10ml）
四、操作步骤：
1.将恒温水浴锅中的水预热到37℃；
2.从液氮罐中取出要复苏的细胞，尽快转入恒温水浴锅中复温，工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率；
3.将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中，充分混匀后，300g离心5min；
离心完成后弃去上清，用1ml完全培养基重悬细胞后，转入T-25细胞培养中，再加完全培养基4ml，之后转入CO2培养箱中培养静置。
细胞冻存步骤
一、所需仪器：
1）-86℃超低温冰箱
2）离心机
3）生物安全柜
4）电动移液器
5）CO2培养箱
6）倒置显微镜
7）液氮罐
二、所需试剂：
1）胎牛血清（FBS）
2）细胞培养级DMSO
3）冻存液：80%FBS+20%DMSO
4）无菌1×PBS pH=7.2
5）消化液：0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA isopropanol
三、所需耗材：
1）离心管（15ml、50ml）
2）T-25细胞培养瓶
3）一次性无菌移液管（2ml、5ml、10ml）
4）1.8ml冻存管
5）程序降温盒
四、操作步骤：
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出，在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，吸弃瓶内的培养基；
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml，之后水平放置培养瓶，旋转震荡培养瓶，使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积，吸弃PBS；
- 重复步骤2一次，之后向瓶内加入消化液1ml，轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min；
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，如还有部分细胞为消化下来，可在生物安全柜内用移液管吸起消化液，吹打培养平面；
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化，然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中，300g离心5min；
- 离心完成后，弃上清，用0.5mlFBS重悬细胞，再加入0.5ml冻存液，用移液管充分混匀，之后转入1.8ml冻存管中；
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
- 第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
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1）我库细胞近3000种，来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。冻存细胞时间为5-7个工作日，活细胞为7-15个工作日。
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| R1000 |
| A4 |
| MSU-1 |
| MSU-2 |
| NRRL 2543 [LSHTM BB325] |
| R3 |
| M-37 |
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文献和实验我养的是膀胱癌 T24细胞（贴壁的）心得如下：1、 T24长的非常快，传代一般1：5传，每4天需要再传。2、虽然是永生化细胞，也一定不要等细胞100%汇合再传代，多次这样细胞状态不好，球形增加，还不容易洗掉。3、要用胰酶（0.25%）--EDTA（0.01%）混合消化液消化好些，一般1分钟内呈球形，即可混悬细胞了。4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。步骤：吸净培养液， PBS洗2次，加消化液室温一分钟左右，要在显微镜下注意观察，不要过头，球形后，吸掉消化液，加1毫升培养
性癌到高度未分化的浸润性癌。其中约70％为分化良好的乳头状癌，25％～30％为分化程度不同的浸润性癌。根据癌细胞分化程度不同，将移行细胞癌分为三级。 （1）移行细胞癌Ⅰ级：癌组织呈乳头状，乳头表面被覆的移行上皮较厚，细胞层次较多，缺乏从底层到表层由柱状细胞到扁平细胞逐渐分化的现象。细胞核大小不甚一致，有些较大染色较深。核分裂像可见，有的局部区域稍多，且不限于基底层（图12-32）。有些癌细胞可浸润固有膜。 图12-32 膀胱移行细胞癌 Ⅰ级 肿瘤乳头状，被覆上皮细胞
为分化程度不同的浸润性癌。根据癌细胞分化程度不同，将移行细胞癌分为三级。 （1）移行细胞癌Ⅰ级：癌组织呈乳头状，乳头表面被覆的移行上皮较厚，细胞层次较多，缺乏从底层到表层由柱状细胞到扁平细胞逐渐分化的现象。细胞核大小不甚一致，有些较大染色较深。核分裂像可见，有的局部区域稍多，且不限于基底层（图12-32）。有些癌细胞可浸润固有膜。 图12-32 膀胱移行细胞癌 Ⅰ级 肿瘤乳头状，被覆上皮细胞层次增多，部分排列不整齐，核大小不甚一致
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