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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
31
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8
- 规格:
株
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
以下是EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8品牌详细说明:
细胞名称 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于感染了EB病毒的绒猴白血球。B95-8是一个连续株并释放高滴度的EB病毒。 此细胞株可提供EB病毒用于建立人的连续淋巴细胞株。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:
2传代;5-6天一次
传代情况 PN12
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体 44-47
使用权限 A类
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8品牌培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8品牌冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8品牌TF ATF2 (Phospho-Thr69,71) Competitor dsDNA (1 ea)TF ATF2 (Phospho-Thr69,71) Competitor dsDNA
CUG [3-羧基香豆素-β-D-吡喃半乳糖苷]CUG [3-Carboxyumbelliferyl beta-D-galactopyranoside]
5-Aminolevulinic Acid (hydrochloride) (500 mg)5-ALA|δ-Aminolevulinic Acid; 5-amino-4-oxo-pentanoic acid, monohydrochloride
4-Iodoamphetamine (hydrochloride) (10 mg)4-IA|p-IA|p-iodo-α-methyl-Phenethylamine|para-Iodoamphetamine; 4-iodo-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
F2201 (25 mg)5-fluoro JWH 412|
Clorgyline (hydrochloride) (50 mg)N-2,4-Dichlorophenoxypropyl-N-methylpropargylamine; N-[3-(2,4-dichlorophenoxy)propyl]-N-methyl-2-propyn-1-amine, monohydrochloride
DAPI (hydrochloride) (25 mg)2-[4-(aminoiminomethyl)phenyl]-1H-indole-6-carboximidamide, dihydrochloride; 4’,6-Diamidino-2-phenylindole|FxCycle Violet; DAPI (hydrochloride)
C-6 NBD Ceramide (10 mg)N-[7-(4-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole)]-6-aminocaproyl-D-erythro-sphingosine; C-6 NBD Ceramide
1,2-Dioctanoyl-sn-glycerol (25 mg)1,2-bis(O-octanoyl)-sn-glycerol; 1,2-Dioctanoyl-sn-glycerol
Arachidonyl Trifluoromethyl Ketone (50 mg)1,1,1-trifluoro-6Z,9Z,12Z,15Z-heneicosatetraen-2-one; AATFMK|ATK; Arachidonyl Trifluoromethyl Ketone
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文献和实验计数)(一般1ml血能分离出1×10^6个细胞,故4ml血约有4×10^6个细胞)3、EB病毒转化淋巴细胞① 取EBV上清1ml重悬上述细胞,37℃水浴,2h,20min晃动一次② 加入3ml 20%FBS-1640全培,含0.2 μg/ml cyclosporin A (环孢素A Sigma Product No. C1832 )③ 分两孔,2ml/孔加至24孔板中(如果分离的血量大,请酌情考虑加入25cm2培养瓶中培养),37℃,5%CO2培养。④ 一般24h后即可见到细胞聚集成团生长,3-5天可见液体PH
min ④ 小心吸取上层血浆,保存备用,避免扰动细胞。 ⑤ 小心吸取淋巴细胞层至新的15ml离心管中 ⑥ 加入6mlBSS,以吸管轻轻重悬细胞 ⑦ 100g,18℃,离心10min,弃上清 ⑧ 以8mlBSS再次洗涤一遍,离心,弃上清(重悬同时进行细胞计数) (一般1ml血能分离出1×10^6个细胞,故4ml血约有4×10^6个细胞) 3. EB病毒转化淋巴细胞 ① 取EBV上清1ml重悬上述细胞,37℃水浴,2h,20min晃动一次 ②
WI-38 胚肺 Chang Liver 张氏肝 SL-7 胚肺 QSG-7701 肝细胞 H.A. 羊膜 293 Ad5DNA转化 的胚肾 WISH 羊膜 牙髓细胞 5.其它类 CV-1(M) 非洲绿猴肾 EBTr 牛胚气管 VERO 非洲绿猴肾 MDBK 牛肾细胞 HepII 猴肾 COS-1 SV40转化的非洲绿猴肾 LLC-MK2 恒河猴肾 COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾 MLA-144 长臂猿淋巴瘤 B95
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