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- 上海研生
- YS-S0756
- 进口/国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 库存：
35
- 生长状态：
半贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
详见说明书
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 英文名：
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4
- 规格：
株
细胞名称 抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体，抗原为人IgG。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105～1×106 cells/ml之间，每周换液2～3次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4说明书冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4说明书培养操作步骤
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4说明书实验要点及说明
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
大鼠 FCGRT 基因全长ORF克隆
人 FVII / F7 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 TXNL4A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 Hexosaminidase B / HEXB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CD27 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
雪貂 CD20 / MS4A-1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 DR6 / TNFRSF21 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 ANPEP / APN / CD13 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4说明书BAY-85-3934 （25 mg）Molidustat； 1,2-dihydro-2-[6-（4-morpholinyl）-4-pyrimidinyl]-4-（1H-1,2,3-triazol-1-yl）-3H-pyrazol-3-one
Docosatetraenoyl Ethanolamide （50 mg）N-（2-hydroxyethyl）-7Z，10Z，13Z，16Z-docosatetraenamide； DEA； Docosatetraenoyl Ethanolamide
Carbaprostacyclin-biotin （100 ug）N-6，9。alpha。-methylene-11。alpha。，15S-dihydroxy-prosta-5E，13E-dien-1-oyl-N-biotinoyl-1，5-diaminopentane； Carbacyclin-biotin|cPGI-biotin； Carbaprostacyclin-biotin
Prostaglandin H1 （50 ug）9。alpha。，11。alpha。-epidioxy-15S-hydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； PGH1； Prostaglandin H1
19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α （1 mg）9α，11α，15S，19R-tetrahydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 19（R）-hydroxy PGF2α； 19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α
N-BOC-乙二N-BOC-ethylenediamine
4-Phenylbutyric acid， sodium salt， Sodium phenylbutyrate， 4-PBSodium 4-phenylbutyrate
Pimozide （100 mg）NSC 170984|Orap|R 6238； 1-[1-[4,4-bis（4-fluorophenyl）butyl]-4-pipeidinyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-one
p-nitro-Pifithrin-α （1 mg）p-nitro-PFT-α； 1-
Metaxalone （100 mg）AHR 438|NSC 170959|Skelaxin； 5-[（3,5-dimethylphenoxy）methyl]-2-oxazolidinone
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文献和实验―杂交瘤技术、DNA重组技术等。 单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞，与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因此，它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力，还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。 单抗的制备过程 1，抗细胞表面分子的单抗 这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
的设计和合成 根据Ig可变区基因的序列特点，以及已发表的小鼠VH和VL基因序列，设计若干套分别对应于不同亚类Ig骨架区序列FR1和FR4的通用引物。为了便于克隆和表达，在引物两端引进合适的酶切位点。其中VH5’端引物为XhoI识别序列，VH3’端引物为SpeⅠ识别序列；VL 5’端引物为XbaⅠ，3’端引物为EcoRⅠ。利用不同的5’端和3’端引物组合进行相同的PCR扩增抗小细胞肺癌单抗的VH和VL基因，发现如下一套引物扩增效果最好；扩增产物琼脂糖凝胶电泳带均一，且无杂带。其序列如下：
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