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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介：
异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷简称IPTG，分子式为C9H18O5S，分子量为238.30
CAS号为367-93-1。IPTG是一种作用极强的诱导剂，不易被细菌代谢而且很稳定。基于这个特性，当携带带lacZ 基因载体DNA以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可根据是否呈现蓝/白色菌落(或噬菌斑)判断出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
IPTG溶液(20%,0.8mol/L)经过滤除菌，一般工作浓度为1mM，主要用于诱导外源基因的表达，也用于原核表达系统，使其表达量增高，产物稳定，且易鉴定、易纯化。IPTG经常与X-Gal合用，X-Gal的工作浓度一般在5～10μg/ml。
IPTG(20%,0.8mol/L)
操作步骤(仅供参考)：
1、 在琼脂培养基中，加入Amp、IPTG、X-Gal，冷却制成培养基平板，转化、培养。
2、 可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
IPTG(20%,0.8mol/L)
注意事项：
尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
注意无菌操作，避免细菌污染。
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文献和实验℃ 继续培养3 -5h ;如果表达载体的原核启动子为tac 等,则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后加IPTG 至终浓度为1 mmol / L.继续培养3 -5h . ( 5 )取上述培养液1 mL , 1000g 离心,1 min ,沉淀,加100 μL 聚丙烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测. 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化： 细菌的裂解 常用方法有：① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学
载体操作中最常用的几个概念： 1. The lac Z gene may be used as a simple "reporter" gene, separated from its natural promoter. For example, we might put the lac Z gene in front of a mammalian promoter
，注意避免大量光照。在超净台操作时可以将照明灯关掉。我做的蓝白斑筛选菌长得太密了，一般不全涂。取十分之一，和40XGAL和4IPTG混合就行了。如果涂少了的话，蓝斑会不明显。发现蓝斑不明显可以把板放4度半个小时以后颜色会更深一些 答案5：在含有适当抗菌素的预制90mm琼脂板中央滴加40ul2%x-gal（20mg/ml）, 7ul20%IPTG（0.8mol/L）上现涂的,涂的时候动作要快，而且要均匀。 (责任编辑：大汉昆仑王)
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