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- 百奥莱博
- JN0112-HED
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
193
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
20次(1μg)
特别提示：包括pBalbSec质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：pBalbSec质粒
产品货号：JN0112
产品规格：20次(1μg)
pBalbSec专为目标蛋白在大肠杆菌中高效分泌表达设计，是预先用XhoI线性化的载体，可配合BalbRec PCR产物一步无缝克隆试剂盒（CatNo. JN0001）使用。
外源蛋白在大肠杆菌中表达容易形成包涵体，使获得有生物学活性的蛋白增加困难。同时大肠杆菌细胞内为还原环境，目标蛋白二硫键无法形成。周质分泌是获得正确折叠的目标蛋白质的有效途径，常见表达载体往往由于蛋白表达过快，目标蛋白来不及正确折叠和分泌而形成包涵体。该质粒适用于阿拉伯糖诱导，有较强的剂量依赖性。合适的阿拉伯糖浓度能够在保障表达效率的同时获得有效的蛋白质分泌。
目的基因扩增按常规方法设计引物后，在5′端引物前添加以下序列：CCG GCG ATG GCC ATG； 3′端引物前添加：CGC GGC CGC AAG CTT。
注意：5′端引物从第一个氨基酸不是甲硫氨酸(ATG)时，可使用 CAG CCG GCG ATG GCC。不希望目标蛋白C端保留His Tag时，3′端引物需要加入终止密码子。
产品组成：
| 组份 | 规格 |
| pBalbSec | 1ug |
| BalbRec 重组酶 | 20μl |
| 10×BalbRec 重组缓冲液 | 50μl |
| Control Insert（50 ng/μl） | 10μl |
| 附赠 | |
| 2×pfu MasterMix (快速上样型) | 1ml |
| 2×Fast Taq MasterMix(快速上样型) | 1ml |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100μl |
图例一）pBalbSec目标蛋白分泌表达与纯化。
阿拉伯糖在合适的诱导条件下目标蛋白基本以可溶形式分泌，纯化结果表 明每升培养物可获得300毫克目标蛋白。
质量控制：pBalbSuno线性化载体经过严格的自连测试以及连接效率测试。
除了pBalbSec质粒,，我公司还供应以下相关产品：
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BTN100103B 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 20次
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BTN140389 酿酒酵母Y187感受态细胞 10×100μL
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RFT165 BL21(DE3)化学感受态细胞 20×100μl
RFT166 DH5α化学感受态细胞 20×100μl
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MQ0057 EHA101农杆菌感受态细胞 10×100μl/50×100μl
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
summityoung 那位学长有ISRE质粒，谢谢。我有多种质粒可以交换 zfv2007 Do you have any lentivirus plasmid? zhujoker 我有，就是具有IRES启动子的质粒吗？ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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