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T4 DNA连接酶(400U/μL)

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  • 2025年07月16日
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    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 规格

      2万U/10万U

    特别提示:包括T4 DNA连接酶(400U/μL)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:T4 DNA连接酶(400U/μL)
    产品货号:CZ036
    产品规格:2万U/10万U

    产品简介:
    T4 DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下,可催化双链DNA或RNA上的5’-磷酸末端和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键,可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应,也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。
    编号 组份 20000 U 100000 U 储存条件 保质期
    ① 10×T4 DNA Ligase Buffer 100 μL 500 μL -20℃ 2年
    ② T4 DNA Ligase 50 μL 250 μL
    单位定义:
    在20 μL 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中,6 μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟,50%的DNA片段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。
    失活或抑制:
    65℃加热10分钟可使T4 DNA连接酶失活。
    产品特点:
    高纯度,确保该产品具有zuì高的活性和纯度,无核酸酶、外切酶、RNA酶、外源DNA/RNA等污染。
    操作说明:
    1.在冰浴条件下,将下列反应液加入无菌、无核酸酶微量离心管中:
    a.10×T4 DNA连接缓冲液需于室温下解冻后混匀。
    b.插入DNA的加入量需为载体DNA的3倍摩尔量。
    c.T4 DNA连接酶需zuì后加入反应体系中。
    2.使用移液器轻柔吹打均匀后,短速离心;
    3.对于黏性末端,可于16℃孵育过夜或室温孵育10分钟;对于平末端或单碱基突出片段,则可于16℃孵育过夜或室温孵育2小时;
    4.置于65℃加热10分钟,使酶失活;
    5.冰浴冷却后,取1~5 μL反应液转化至50 μL感受态细胞中。

    除了T4 DNA连接酶(400U/μL),,我公司还供应以下相关产品:
     
    货号 名称 规格
    BTN120513 即用型蓝白T载体C型(T7-T3,无MCS) 20次
    BTN100103B 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 20次
    BTN60206 氨苄青霉素溶液 10mL
    BTN120687 环孢霉素A 1mL
    YT003 质粒大量抽提试剂盒 20次
    YT454 Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒) 1μg
    YT472 C端Myc标签融合蛋白质粒 1μg
    YT477 N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) 1μg
    RFT110 pRT20-T载体克隆试剂盒 20次
    RFT113 JM109化学感受态细胞 20×100μl
    SY0276 IPTG 5g
    SY0280 多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 10T
    JN0108 pBalbTrx-Tev质粒 20次(1μg)
    QN1062 pEGFP-N1 哺乳动物表达载体 20μl
    CZ036 T4 DNA连接酶(400U/μL) 2万U/10万U
    MQ0050 Tuner(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
    MQ0055 AGL1农杆菌感受态细胞 10×100μl/50×100μl
    QN2142 BL21(DE3)感受态细胞 10×100μl|20×100μl
    QN2146 TOP10感受态细胞 10×100μl|20×100μl
    WH0188 BL21感受态细胞 100 μl×5|100 μl×10

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    相关实验
    • 什么是T4 DNA连接酶

      相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。

    • 【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答

      连接酶,反应10分钟。平滑末端连接:在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时,或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外,NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1:在25°C条件下,用1 unit(1:400稀释后取1 µlT4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图

    • DNA连接酶概述

      噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链,分子量为60KD,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNADNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外,NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率,而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶,还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。 DNA连接酶 - DNA连接酶种类 T4DNA连接酶

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