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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口(1)。 -------------------------------------------------------------------------------- 来源: 源于E.coli C600 pcl857 pPLc28 lig8 (2)。 应用: 限制性酶切片段的克隆 (3)。 将linker或adapters 连接到DNA片段的平滑末端。 反应缓冲
甲醛的0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.4)先快后慢灌流固定2h,取脑置于300g/L蔗糖中(4℃)直至组织沉底,冰冻切片机连续冠状切片,片厚30μm,切片分套,置于0.01M PBS中存放。 1.32 免疫染色 取1套切片在0.01M PBS中漂洗后,入含0.3% Triton X-100的0.01M PBS中浸泡30min(室温)。然后进行免疫组织化学荧光染色:加入突触素I抗(1:500,Santa Cruz公司 美国)孵育24h(室温,在湿盒内)。在0.01MPBS液中漂洗3次,每次
甲醛的0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.4)先快后慢灌流固定2h,取脑置于300g/L蔗糖中(4℃)直至组织沉底,冰冻切片机连续冠状切片,片厚30μm,切片分套,置于0.01M PBS中存放。 1.32 免疫染色 取1套切片在0.01M PBS中漂洗后,入含0.3% Triton X-100的0.01M PBS中浸泡30min(室温)。然后进行免疫组织化学荧光染色:加入突触素I抗(1:500,Santa Cruz公司 美国)孵育24h(室温,在湿盒内)。在0.01MPBS液中漂洗3次,每次
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