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CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit
- 规格:
1 kit
CloneMiner™ II cDNA 文库构建试剂盒
货号: A11180
产品概述
CloneMiner™ II cDNA 文库构建试剂盒是第二代 CloneMiner™ 试剂盒,可快速构建高代表性 cDNA 文库,无需限制性内切酶克隆。这种创新性文库构建技术将 SuperScript™ III 逆转录酶与 Gateway™ 克隆技术相结合,从而发现获得先前不可获得的全长克隆。该试剂盒还避免了使用耗时、低效的连接反应,使得文库构建更快速并提供更好地表示。
CloneMiner™ II cDNA 文库构建试剂盒可确保:
•较高的一级滴度
• 较大的平均插入片段大小
• 最高全长基因百分比
• cDNA 高效克隆到多个目的载体无需限制酶酶切和连接
CloneMiner™ II 试剂盒如何工作:
•全长 cDNA 得率较高:CloneMiner™ II 试剂盒包含 SuperScript™ III,可获得较高 cDNA 得率。SuperScript™ III 逆转录酶 (RT)(一种具有专利技术的 SuperScript™ II RT 突变)在 50°C 下具有活性,半衰期为 220 分钟。其还具有可减少 RNase H 活性的点突变,从而在第一链合成过程中降低 RNA 降解并提高全长基因的百分比。
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基础货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验有SMART cDNA 合成和文库构建到? TriplEx2 或者Creator 供体载体 pDNR-LIB所需的试剂。因为该试剂盒是特别针对文库构建来设计的,所以它与Clontech™ PCR-Select™cDNA 差减杂交试剂盒不能配合使用。 SMART PCR cDNA Synthesis Kit 可以用来与Clontech™ PCR-Select™ cDNA 差减技术一起使用。总RNA 不能直接用来做差减实验,但可以通过SMART PCR cDNA Synthesis Kit 来扩增出
RNA 构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多,在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录,这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好,虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRNA量最好在0.05-0.5微克左右,这就要求起始总RNA量较多。虽然有的试剂盒声称少至几十个纳克的总RNA也可以构建cDNA文库,但这是针对材料极为稀缺者而言,但起始RNA太少还是会或多或少影响文库构建
2特别适合研究一个基因在不同表达系统中的表达,对于后续的工作有利。 缺点: 1无论是Gateway还是Topo,封闭的系统仅适用于Invitrogen提供的表达载体,使得适用成本高。而且在启动子和目的基因间必需插入一段特定的噬菌体重组酶识别序列,对表达的影响不好估计。 2所得的并非都是全长cDNA 有不对之处忘大家指正 Clontech的: 采用的是SMART与Infusion技术:合成引物时两端对应
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