- ￥632
- invitrogen
- EP0421
- 美国
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
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- 供应商：
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- 英文名：
Klenow 片段 (exo–) (5 U/µL)
- 规格：
300 units
Klenow 片段 (exo–) (5 U/µL)
货号: EP0421
产品描述
Thermo Scientific Klenow 片段 (exo-) 是 DNA 聚合酶 I 的大片段。其表现出 5'→3' 聚合酶活性，但缺乏 DNA 聚合酶 I 的 3'→5' 和 5'→3' 核酸外切酶活性。酶的 3'→5' 核酸外切酶活性通过 3'→5'-核酸外切酶活性位点中的突变被消除。
产品优势
• 缺乏 3'→5' 核酸外切酶活性
• 掺入经修饰的核苷酸（例如，Cy3、Cy5、荧光素、罗丹明、氨基烯丙基、生物素标记的核苷酸）
• 在限制性内切酶、PCR 和 RT 缓冲液中有活性
应用
• 随机引物 DNA 标记
• 通过填充 dsDNA 的 5'-突出端进行的标记
•链置换扩增 (SDA)
• 通过 Sanger 方法进行的 DNA 测序
上海嵘崴达实业有限公司，专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品，
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌：
Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
GE试剂，耗材，部分常用现货，周二，周五定货，3周左右。
SIGMA试剂，周一，五定货，3周左右到货。
THERMO试剂，部分现货，周三定货，2-3周到货。
ABCAM试剂，国内现货三天左右，期货四周左右。
Peprotech试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
罗氏原料，请来电来邮咨询。
OXOID，BD培养基础货期八周左右，部分现货。
MCE激动剂，ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验冰浴上依次加入： 2 μ l 10 ×反应缓冲液 1 μ l 0.5 mmol/L dATP （终浓度 25 μ mol/L ） 1 μ l 0.5 mmol/L dGTP （终浓度 25 μ mol/L ） 1 μ l 0.5 mmol/L dTTP （终浓度 25 μ mol/L ） 5 μ l α－ [32 P] dCTP （终浓度 0.83 μ mol/L ） 1 μ l 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 大片段（ 2U
。如：HindⅢ A↓A G C T TEcoRⅠ G↓A A T T CHpuⅡ C↓C G G2.酶单位数：在最适温度、PH条件下，1小时完全水解1μgλDNA所需的酶量为1个单位。试剂：(1)λDNA（0.38μg/μl）(2)HindⅢ (16u/μl)(3)酶解Buffer(Tris-HCl,NaCl,MgCl2,DTT )(4)反应终止液（溴酚蓝1%，SDS 1%，EDTA 2%，甘油50%）方法：1.取两只EP管充分混匀（1）λDNA 10μl，双蒸水 10μl（2）λDNA 10μl
）1.5 μL，LATaq DNA 聚合酶（5 U/μL）1.5 U，dd H2O 补足 25 μL。将首轮扩增产物以 TE 缓冲液（pH 8.0）稀释 10 倍作为 Nested PCR 的模板。扩增程序：94 ℃ 25 s，72 ℃ 4 min，7 个循环；94 ℃ 25 s，67 ℃ 4 min，32 个循环；67 ℃ 7 min，4 ℃ 保存。方法二 TAIL-PCR 技术1 基因组 DNA 提取（同上）2 TAIL-PCR 引物设计根据已知的基因组 DNA 片段序列，以待扩增的 5' 末端
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
