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文献和实验相关专题免疫磁珠做细胞分选(MACS) 用免疫磁珠做细胞分选(MACS)是高效简捷的免疫细胞及其它细胞的分离纯化方法。 原理是已包被一抗的磁珠与细胞表面相应分子 特异性结合,或者已包被二抗(羊抗小鼠或羊抗大鼠)的磁珠与预先已与细胞表面分子特异结合的一抗结合。磁珠携带与之结合的细胞吸附于分离柱/试管上,实现阳性细胞分离或阴性细胞的分离。本节介绍超微磁珠间接标记、用分离柱阳性分选细胞的方法。 Protocal: 1.离心
磁珠分选细胞注意事项1、待分选细胞中如有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培养去除,或者提高EDTA浓度。2、抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞。3、新鲜分离骨髓细胞,先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化,可使细胞团块解聚,从而提高分离效率。4、上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块。5、用分离柱分选,应用真空抽滤水,减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞。6、细胞悬液加入分离柱中时,应将滴管伸至底壁后加入,避免将细悬液沿管壁流入,使管壁残流末分选细胞,以致后继洗柱过程中
流式细胞仪、免疫磁珠及亲和板结合分离法分选c kit+肝癌细胞的比较
季青公司;兔抗人c kit多克隆抗体、FITC标记的羊抗兔IgG(1∶200)购自丹麦Santa Cruz公司;抗兔IgG1免疫磁珠购自德国Miltenyi Biotech公司;其他常用试剂为国产分析纯。 1.1.4 主要仪器:免疫磁珠分选磁力架、MS磁性分离柱购自德国Miltenyi Biotec公司;Epics Altra型流式细胞仪购自美国Beckman Coulter公司;各种常用耗材购自广州威佳科技公司。1.2 方法 1.2.1 分离、培养肝癌细胞:参考文献方法,分离
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