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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
FastStart™ Taq DNA聚合酶,5 U / μl
- 供应商:
嵘崴达
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−20°C
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需确认
- 保质期:
见产品外包装
- 规格:
50 reactions
FastStart™ Taq DNA聚合酶,5 U / μl
dNTPs included: no, hotstart, suitable for PCR
别名:
PCR, PCR | Taq |聚合酶, taq
一般描述
FastStart™ Taq DNA聚合酶是一种多功能酶,可用于多种应用和多种仪器平台。这种改良的热稳定重组Taq DNA聚合酶在低于+75℃的温度下是无活性的,但在+95℃下通过2至4分钟的热活化步骤即可活化。由于它在低温下无活性,因此FastStart™ Taq DNA聚合酶不会对可能在此温度下形成的非特异性引物-模板杂交体进行延伸。由于酶在PCR准备期间和初始变性步骤之前都能保持无活性,因此FastStart™ Taq DNA聚合酶是热启动PCR的理想工具。
应用
FastStart™ Taq DNA聚合酶是一种热稳定的化学修饰形式的重组Taq DNA聚合酶。在设置PCR过程中,酶在+15至+25°C范围无活性,然后在初始变性期间的+ 95°C条件下活化。由于其独特的酶设计和优化的缓冲系统,该酶可提供卓越的结果。由于酶在PCR设置期间和初始变性步骤之前都能保持无活性,因此FastStart Taq DNA聚合酶是热启动PCR的理想工具。
它可用于:
- PCR
- 多重 PCR
- 复杂模板,例如,二级结构或高 GC 含量序列
- 自动 PCR,例如,室温处理
- 3kb 以下长度的热启动 PCR
- 3kb 以下长度的热启动 RT-PCR
- 定量逆转录 PCR (RT-qPCR)
- 亚硫酸盐特异性 PCR
请使用 FastStart™ Taq DNA聚合酶、dNTPack和即用型PCR核苷酸混合物。为方便起见,请选择即用型FastStart™ PCR混合液的2x浓缩液。
特点和优势
FastStart Taq DNA聚合酶是一种经过修饰的重组Taq DNA聚合酶,在低于+75°C的温度下无活性。该试剂盒包括一个优化的PCR缓冲液和GC-RICH溶液,可用于处理各种模板。高酶稳定性,方便自动化移液。
- 更高的特异性、灵敏度和产量:
热启动 PCR 使 PCR 设置更容易。
- 使用自动化设置。
使用该酶混合物,在+ 15℃至+ 25℃下可稳定24小时。
- 防止 PCR 携带污染。
掺入 dUTP 并使用尿嘧啶-DNA 糖基化酶预处理 PCR 预混液。
- 优化的聚合酶链式反应(PCR)缓冲体系和高GC含量溶液,适用于各种模板
- 独特的酶设计和优化的缓冲体系,可提供优异的结果。
包装
1个试剂盒包含5个组分
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文献和实验的前提条 件,也是PCR反应能迅速发展和广泛应用的原因.Taq DNA聚合酶还具有逆转录活性, 其作用于类似逆转录酶.此活性温度一般为65~68℃,有Mn2+存在时,其逆转录活性 更高. (二)离子依赖性 aqDNA 聚合酶 是Mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感.以活性程度 很低的鲑鱼精子DNA为模板,dNTP的浓度为0.7~0.8mmol/L时,用不同浓度Mg2+进行 PCR反应10min,测定结果为Mgcl2浓度
Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的.(一)酶活性与热稳定性该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸,70℃延伸率大于60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃以上) 或过低(22℃)都可影响Taq
mmol/L时可抑制40~50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离 的Mg2+浓度,因而MgCl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5~1.0mmol/L。适当浓度的KCL能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50~60%,其最适浓度为50mmol/L,高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。 (三)忠实性 TaqDNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,而无3'→5'外切活 性,它不具
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