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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)
- 保质期:
一年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-25~-15℃保存
- 规格:
1mL(14384ES03)/5mL(14384ES08)/50mL(14384ES50)
| 规格: | 1mL(14384ES03) | 产品价格: | ¥13505.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5mL(14384ES08) | 产品价格: | ¥54015.00 |
| 规格: | 50mL(14384ES50) | 产品价格: | ¥432120.00 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一种基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升,针对复杂的模板也能快速准确的完成PCR反应。其保真性显著提高,且解决了常规高保真酶无法以dUTP为原料进行聚合反应、无法使用含有dUTP的扩增引物以及无法使用含有dUTP的DNA作为扩增模板等诸多问题。本产品具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。
产品信息
| 货号 |
14384ES03 / 14384ES08 / 14384ES50 |
| 规格 |
3 KU / 15 KU / 150 KU |
| 浓度 |
3 U/µL |
组分信息
| 组分编号 |
组分名称 |
14384ES03 |
14384ES08 |
14384ES50 |
| 14384-A |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL) |
1 mL |
5 mL |
50 mL |
产品应用
1.使用含dUTP的引物进行高保真文库扩增;
2.使用含dUTP的模板进行高保真文库扩增;
3.使用含dUTP的dNTP进行高保真文库扩增。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与常规高保真酶的使用方法略有不同。在使用前,请务必仔细阅读使用说明。
1.所有操作应于冰上进行,2×Canace® Uracil+ PCR buffer解冻后请充分混匀。体系配置之前请预热PCR仪,各组分添加完成之后用移液器吸打充分混匀并短暂离心至管底,然后置于预热的PCR仪中进行反应。所有组份使用完毕之后及时放回-20℃保存。
1)推荐配置应用反应与体系:
| 组分 |
体积 |
| 模板DNA* |
X µL |
| 2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+,dNTPs) |
25 µL |
| 正向引物 (10~25 μM) |
1~2.5 µL |
| 反向引物 (10~25 μM) |
1~2.5 µL |
| Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)** |
0.34 µL |
| ddH2O |
Total to 50 µL |
*:使用纯化后的高质量DNA模板可以显著提高扩增效率和成功率。
**:在50 μL体系中,推荐使用1 U 本品,可以在0.5-2 U之间进行优化,请勿超过2 U。此外,为了防止本品因3’→5’外切酶活性降解引物,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
2)反应体系中dNTPs使用终浓度为200 μM,如特殊情况下需要制备含dUTP的模板,可自行额外添加dUTP至终浓度为400 μM。反应体系中Mg2+终浓度2 mM,可供参考。
2.推荐反应程序
| 温度 |
时间 |
循环数 |
| 98°C |
1 min* |
1 |
| 98°C |
10 sec |
1~15(根据实验要求) |
| 60°C** |
30 sec |
|
| 72°C*** |
30 sec |
|
| 72°C |
5 min |
1 |
| 4°C |
Hold |
- |
*:预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;文库为1 min;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
**:退火温度推荐使用60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
***:延伸温度和时间:推荐使用72°C,延伸时间根据实际需要进行调整。
注意事项
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2.本产品仅作科研用途。
Ver.CN20240415
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文献和实验,从而节省了花费在筛选大量PCR产物上的时间。图一 示意GeneRacer™的工作原理。RNA样品经CIP和TAP处理,保证GeneRacer™寡聚RNA仅同全长转录本连接。然后使用SuperScriptⅡ逆转录酶对这些转录本逆转录,得到的cDNA做为PCR的模板。GeneRacer™寡聚RNA序列做为GeneRacer™ 5’引物结合位点,这样,只有具有全长5’末端的cDNA才会被扩增。使用GeneRacer™步骤及高保真度Platinum® Taq DNA聚合酶,就可以确保得到最高效的实验结果。敏感
中在扩增DNA时出错率(error rate)最低的。它比Taq及变体低近10倍,比Vent和Pwo低2-4倍。Pfu酶的超常纠错特性是由该酶本身的性质决定的。其它高温DNA聚合酶与Pfu酶混合使用,可以部分降低产品的错误率,但效果却达不到单独使用Pfu酶时的高保真率。在基因克隆、表达和基因突变分析等现代分子生物学实验操作中,由于对DNA扩增产物的正确率要求非常高,,一般认为Pfu酶可取代Taq成为首选高保真高温DNA聚合酶。二、浓度: 2.5-5U/μl三、活性定义: 1单位Pfu酶定义
riu m h ea d b lig h t in w h ea t b y exp ressio n o f A ra b id o p sis N P R l . Mol. Plant Microbe Interact.19, 123-129. 31. M a n o h a ra n , M . , D a h leen , L. S . , H o h n ,T. M . , N ea te, S . M . , Y u , X , H












