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- 英文名:
DIG Oligonucleotide Tailing Kit, 2nd generation
- 供应商:
嵘崴达
- 库存:
需确认
- 规格:
25 REACTIONS
DIG 寡核苷酸拖尾试剂盒,第2 代
sufficient for 25 reactions (100 pmol oligonucleotide per assay; 1 ug of a 30-mer oligonucleotide)
一般描述
我们致力于为您带来更加绿色的替代产品,这些产品遵守一项或多项绿色化学12项原则。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
第二代DIG寡核苷酸加尾试剂盒可利用末端转移酶。在它的催化下di高辛(DIG)-11-脱氧尿苷三磷酸(dUTP)和脱氧腺苷三磷酸(dATP)被添加到寡核苷酸的3′-OH末端上。
应用
第二代DIG寡核苷酸加尾试剂盒已被用于标记以下应用中的寡核苷酸探针:
- Northern印迹杂交检测
- 原位杂交 (ISH)。
- 荧光原位杂交 (FISH)。
除了常用的杂交技术外,DIG标记的寡核苷酸对于筛选表达文库中的序列特异性DNA结合蛋白(例如转录因子)尤其有用。
特点和优势
使用DIG-11-dUTP 和重组末端转移酶拖尾3'处的寡核苷酸。寡核苷酸用 DIG-dUTP 和 dATP 加尾,平均尾长 为50 个核苷酸(尾长范围:10-100)。
- 由于掺入了几种DIG核苷酸,因此杂交探针非常敏感
- 由于寡核苷酸具有小分子量,可用于快速杂交动力学
- 单链探针,在杂交过程中不会复性
- 可以根据实验设计序列
- 特别适用于原位杂交;由于寡核苷酸具有小分子量,因此易于扩散到固定的组织和细胞中。
包装
包含11种组分的1个试剂盒
原理
DIG-dUTP和dATP的浓度应使DIG掺入尾部的浓度最高,并具有最佳的DIG和dATP间距,从而在杂交实验中获得最高的灵敏度。DIG-dUTP和dATP作为单独的溶液提供,可以在尾长度、半抗原间隔和未标记核苷酸的使用方面提供更大的灵活性。
制备说明
工作浓度:寡核苷酸
在一种标准的标记反应中,最多可应用100 pmol寡核苷酸(1μg 30聚体寡核苷酸)。
储存及稳定性
-15至-25 °C储存。(试剂盒不打开)
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