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pACYC184大肠克隆质粒

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  • 2025年07月13日
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    • 英文名

      pACYC184质粒

    • 库存

      41

    • 供应商

      上海禾午生物科技有限公司

    • 规格

      2ug冻干粉&300ul甘油菌

    质粒信息: pACYC184大肠克隆质粒 宿主分类:大肠杆菌质粒 用途:基因克隆 抗性:Chl/Tet 菌株:DH5α 培养条件:37℃ 复制子:p15Aori 质粒大小:4245bp 5测序引物:根据序列设计 3测序引物:根据序列设计 备注:丰富的酶切位点 分类:大肠杆菌质粒 用途:基因克隆 质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 电话:17317861055 QQ:161303665 提供质粒构建、质粒提取及进口Addgene质粒代购服务

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    图标文献和实验
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    • 质粒构建及提取概述

      1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A

    • 质粒与引物设计篇

      系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化

    • TFPI的基因工程

      冲液后,PCR扩增TFPI基因。     (二)TFPI基因的体外重组与测序     以EcoRI和BamHI双酶切扩增出的TFPI基因和pGEM-3Zf(-)质粒,在T4DNA连接酶的作用下,将TFPI基因与pGEM-3Zf(-)质粒重组获得pGEM-3Zf(-)-TFPI克隆质粒,转化大肠杆菌DH5α,涂LBA平板,挑阳性克隆。     为了保证所获基因的准确性,必须对其进行DNA序列测定。现有许多生物技术公司能够提供测序服务,其快捷、方便,且价格合理,为大多数实验室所采用。     (三)表达

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