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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pMD19-Control质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验编码区的基因片段,其由5'末端的stat密码子(ATG)和3'末端的终止密码子(TAA,TAG或TGA)结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒,通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒,并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α(+)载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α(+)载体(5900bp)用相同的限制酶在37℃消化pET-32α(+)载体和重组pMD18-T载体1小时,然后通过在65℃温育10分钟
1. 质粒载体构建不成功(目的片段和载体不能成功连接)的常见原因分析 ①DNA 片段纯度差:体系中的杂质会降低连接效率,如果使用不纯化直接连接的方法一直无法成功构建载体,可以考虑进行纯化后再进行连接; ②目的片段和载体片段使用比例悬殊,或者用量过多或过少:目的片段和载体的摩尔比需要控制在一定范围之内,否则会影响连接效率,具体比例可以草靠连接酶说明书; ③连接条件不当:比如连接时间不足、温度不合适、酶失活等,可以通过设置对照组来排查原因; ④引物设计问题:比如通过无缝克隆的方式进行连接,同源
或者进入 google,点击」图片搜索」,直接查找图谱。 5. 寒梅砺剑阁(热心生物人整理的) http://yoou.bokee.com/5757561.html 6. 其他的一些核酸数据库 方法三:一些重要试剂公司网页 这些网站除了得到质粒图谱等信息,还可以得到关于质粒使用方面的信息,现在很多质粒,特别是应用比较广泛的质粒都一些公司商业化的质粒,基本是由一个质粒你就会联想到一个公司的名字。 比如简单的,克隆载体 pMD18-T
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