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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
131
- 保质期:
一个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
500ml
特别提示:包括封闭蛋白TBS缓冲系统封闭液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:封闭蛋白TBS缓冲系统封闭液
产品货号:ZN1914
产品规格:500ml
产品保存:4℃保存,一个月有效
产品特点:
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
除了封闭蛋白TBS缓冲系统封闭液,,我公司还供应以下相关产品:
名称:DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒
货号:YT075
规格:共20ml|共100ml
本试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP),用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。
DAB,即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶的催化下,DAB会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB显色后,还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色,也可以用于Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
用于免疫组化或原位杂交时,如果每个片子使用0.2毫升显色液,那么本试剂盒共可以检测100个片子。
储存条件:-20℃,有效期一年。
名称:DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用)
货号:ZN1924
规格:1盒
试剂盒中的内容及包装规格:
显色剂 A:DAB×40倍浓缩液,3ml。
显色剂B:H2O2×40倍浓缩液,3ml。
显色剂C:TBS×40倍浓缩缓冲液(含氯化*(代"镍")),3ml。
产品保存:-20℃避光冷冻保存一年。
DAB是过氧化物酶最重要的显色剂之一,在加金属镍盐的情况下,显色呈鲜艳的紫蓝色,可用于 Western Blotting,免疫组化及各种斑点检查法。本试剂盒采用液体性滴瓶包装,使用方便,并且减少了接触有潜在毒性的DAB。
使用方法:
1.DAB显色:使用DAB显色试剂。按每2ml蒸馏水加显色剂 A,B,C各 1滴,混匀。
2.混匀后加至膜上。
3.室温显色。一般显色1-30分钟。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
4.观察,照相。
名称:免疫荧光试剂盒(人源一抗)(FITC)
货号:ZN2932
规格:400T|800T|1600T
本试剂盒采用SABC系统,是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存,敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统,能明显提高敏感性及降低背景。FITC 激发光波长为 490-495nm,发射光波长为 520-530nm,呈黄绿色荧光。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩兔血清(效价1:10) | 2.5ml/5ml/10ml |
| 生物素标记兔抗人IgG(效价1:100~200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| SABC-FITC(效价1:100~200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭:滴加稀释的正常血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20 分钟。甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记兔抗人IgG(参考效价1:100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC- FITC(参考效价1:100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验那么如何通过改变抗体稀释液的配方,寻求抗体孵育的最佳条件呢?首先要认清,抗体稀释液没有一个绝对通用的配方;一种抗体一个脾气。其次,抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度,以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前,抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk,BSA和gelatin,似乎很少的样子 。。。可是,你有没有考虑过“复方”?--这下配方无限多了吧。1. 采用milk,BSA和gelatin的单方。3% milk,5% BSA,2.很多情况下单方的浓度很高了,背景问题仍不能
使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,将膜蛋白面朝下放于抗体液面上,掀动膜四角以赶出残留气泡;室温下孵育 1~2 h 后,用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次,每次 10 min;再用 TBS 洗一次,10 min。 3. 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触,室温下孵育 1~2 h 后,用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次,每次 10 min;再用 TBS 洗一次,10 min,进行化学
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